工具病毒应用实操手册

1、确定注射参数计算最大体积：称量小鼠获取「平均体重」，并根据您所在机构的规定（例如：10 µL/g）计算单只小鼠的最大注射体积。公式：最大注射体积 (µL) = 10 µL/g × 平均体重 (g)选择给药策略：固定总量 (vg/只): 操作简单，所有小鼠注射相同的病毒总量。按体重计算 (vg/kg): 更为严谨，能校正个体体重差异，尤其推荐在雌雄小鼠混用时使用。2、计算工作液体积计算单只病毒量

适用范围： 靶向眼内组织，特别是视网膜。

适用范围： 主要用于靶向呼吸系统（如上呼吸道、肺部）和通过嗅球入脑。

适用范围： 肌肉组织，可实现高效的局部基因表达，或利用肌肉作为「蛋白工厂」进行全身性分泌。

适用范围： 高效转导肝脏、脾脏、胰腺等腹腔内器官。

慢病毒常用滴度检测方法解析：1、荧光显微镜计数法原理：通过荧光显微镜直接观察和计数表达荧光蛋白的阳性细胞，估算病毒滴度。操作流程：将病毒进行梯度稀释并感染目标细胞；培养 48-72 小时；荧光显微镜下观察计数阳性细胞。计算公式：TU/mL = 阳性细胞数 × 稀释倍数 / 感染体积(mL)优势：设备要求较低；可直观观察细胞形态和感染情况；适合初步评估或小规模检测；操作相对简便。局限性：统计效率低，

适用范围： 实现对大脑特定核团或区域的精准基因转导。

适用范围： 无需手术即可将病毒递送至气管和肺部，并可实现对左、右肺的选择性给药。

适用范围： 直接将病毒载体递送至气管和肺部。

适用范围： 靶向中枢神经系统 (CNS)，如脊髓和大脑。

适用范围： 直接将基因递送至肾脏细胞，用于研究肾脏功能、纤维化及相关疾病。

适用范围： 通过逆行方式实现对整个肾脏的高效基因递送，特别适用于需要广泛靶向肾单位的研究。

适用范围： 直接靶向视网膜细胞，特别是光感受器细胞和视网膜色素上皮 (RPE) 的金标准方法。

1.病毒注射定位与固定： 擦干鼠尾，用酒精消毒后再次擦干。用拇指和食指绷直鼠尾，使一侧静脉朝上。始终从尾巴的远端（靠近尾尖）开始首次注射。进针： 将针头斜面朝上，以几乎与尾巴平行的极小角度，平稳地滑入静脉。推注与判断：成功标志： 推注活塞时应感觉不到任何阻力，部分品系小鼠可见注射点近端的血管瞬间变白。失败迹象： 若感到阻力或注射部位出现皮下鼓包，说明注射失败，应立即停止，拔出针头。再次尝试： 若初

qPCR 检测法：原理：该方法通过特异性引物和探针扩增病毒基因组特定区域，并实时监测荧光信号强度来定量病毒基因组。常用的靶序列包括ITR区域、载体中的启动子或转基因序列等。

适用范围： 高效靶向 P0-P3 新生鼠的心脏。

适用范围： 高效、直接地将基因导入心脏组织，是心脏研究的常用技术。