用途
适用范围： 通过逆行方式实现对整个肾脏的高效基因递送，特别适用于需要广泛靶向肾单位的研究。
材料与仪器
病毒溶液： 使用含 5% 山梨醇 的PBS稀释 AAV，以提高渗透压，促进吸收。
注射工具： 需自制一个由 PE-10 细管连接 30G 针头尖端组成的注射装置，并与微量注射泵相连。
动物准备： 麻醉后，将小鼠左侧卧固定，并对相应区域进行备皮和消毒。
步骤
1.病毒注射
暴露肾脏： 在左侧腰部作~1cm 切口，将肾脏轻柔地挤出并暴露。
血流控制：首先，用微血管夹夹闭输尿管。然后，用另一个血管夹同时夹闭肾动脉和肾静脉。成功的标志是肾脏颜色变为暗红色。
肾盂注射： 将 PE-10 管的针尖插入肾盂（可见的白色小点），启动注射泵，在 1 分钟内注入 50 µL 病毒液。注射完成后，务必将血管夹和针头保持在原位 5 分钟，以使病毒在压力下充分灌注整个肾脏。5 分钟后移除血管夹，肾脏颜色应立即恢复为鲜红色。
2.缝合与恢复
将肾脏复位后，分层缝合肌肉和皮肤。术后立即给予补液和镇痛，并将小鼠置于 37°C 加热垫上直至苏醒。
图片来源：https://app.jove.com/t/67716/effective-safe-gene-delivery-to-mouse-kidney-via-slow-retrograde
来源：丁香实验
