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        脑立体定位

        相关实验:病毒感染细胞实验

        最新修订时间:

        用途

        适用范围: 实现对大脑特定核团或区域的精准基因转导。

        材料与仪器

        麻醉与固定: 麻醉小鼠后,将其固定在脑立体定位仪上,务必使用加热垫维持体温,并持续输送麻醉气体。

        术前准备: 剃毛、用碘伏和酒精彻底消毒头皮区域,并涂抹眼膏以防止角膜干燥。

        步骤

        1.手术与定位

        开颅: 沿头部正中线剪开头皮,暴露并清洁颅骨,清晰地找到前囟 (Bregma)。

        水平校准: 调整立体定位仪,确保颅骨前后、左右均处于水平状态,将前囟点设为三维坐标的零点。

        钻孔: 根据目标脑区的坐标在颅骨上定位,用颅骨钻在标记点轻柔地钻孔,直至刚好穿透颅骨,务必避免损伤下层脑组织。

         

        2.注射关键步骤

        下针: 将已装载病毒的微量注射器缓慢、垂直地降至目标深度。

        慢速注射: 以极慢的速率(如 0.1–0.2 µL/min)启动微量注射泵进行注射。

        充分扩散: 注射完成后,务必将针头在原位静置 5-10 分钟,以防止病毒液体随拔针而回流。

        缓慢拔针: 静置时间结束后,以极慢的速度将针头匀速拔出。

         

        3.缝合与复苏

        术后处理: 缝合头皮,涂抹抗生素软膏,并注射镇痛药及生理盐水。

        动物苏醒: 将小鼠置于加热垫上进行保温复苏。在动物完全清醒并恢复活动前,必须持续监护,且不能与同伴合笼。

        来源:丁香实验

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