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        AAV 注射液配制

        相关实验:病毒感染细胞实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        小鼠、病毒、细胞

        步骤

        1、确定注射参数

        计算最大体积:称量小鼠获取「平均体重」,并根据您所在机构的规定(例如:10 µL/g)计算单只小鼠的最大注射体积。

        公式:最大注射体积 (µL) = 10 µL/g × 平均体重 (g)

        选择给药策略:

        1. 固定总量 (vg/只): 操作简单,所有小鼠注射相同的病毒总量。
        2. 按体重计算 (vg/kg): 更为严谨,能校正个体体重差异,尤其推荐在雌雄小鼠混用时使用。

         

        2、计算工作液体积

        计算单只病毒量 (vg): 根据您选择的策略(A 或 B)确定每只小鼠需要注射的病毒颗粒(vg)总量。

        准备工作液:

        所需原液体积 (µL) = [单只病毒量 (vg) × (注射只数 + 损耗)] / 原液滴度 (vg/µL)

        所需 PBS 体积 (µL) = 总工作液体积 - 所需原液体积

        实用技巧:配液时务必留出损耗余量,建议在计算总体积时额外增加 15-20 µL。

        举例:注射剂量 6 x 10^13vg/kg,注射体积 200µL,小鼠体重 25g(0.025kg),AAV 原液滴度 3 x 10^13vg/mL;

        每只小鼠的病毒注射总量(vg)= 6 x 10^13vg/kg x 0.025kg = 1.5 x 10^12vg;

        注射用的病毒工作液滴度(vg/µL)= 1.5 x 10^12vg/小鼠 / 200µL/小鼠 = 7.5 x 10^9 (vg/µL);

        本次注射需要用到的 AAV 病毒总量(vg)= 7.5 x 10^9 (vg/µL)x (200µL+15µL) = 1.6125 x 10^12vg;

        来源:丁香实验

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