用途
适用范围: 靶向中枢神经系统 (CNS),如脊髓和大脑。
材料与仪器
病毒注射液: 在冰上准备好稀释的病毒液,推荐注射体积为 5–10 µL。可加入 1% 利多卡因以促进扩散。
工具: 准备 Hamilton 微量注射器(推荐 27G 针头)、异氟烷麻醉系统和动物加热垫。
动物准备: 将小鼠麻醉后,使其俯卧。剃毛并用碘伏和酒精彻底消毒注射区域。
步骤
1.病毒注射
定位注射点: 用指尖在两侧髂骨最高点的连线上,找到脊柱中线的L5-L6椎间隙,这是理想的进针点。

进针技巧(两步法):
首先,将针头(斜面朝向头部)在标记点垂直刺入,直至轻轻触碰到椎骨。
然后,将针头角度减小至约30°,向头部方向稍稍滑动,使其滑入椎间隙。


图片来源:
https://app.jove.com/v/31924/intrathecal-delivery-viruses-mouse-model-for-treating-central-nervous
确认进入鞘内:成功进入硬膜下腔时,鼠尾会发生一次明确的、标志性的甩动,此时你会感到针头被轻微“夹住”。若无此反应,则需拔针重新尝试。
注射与拔针: 确认进入后,以极慢速度(如 1 µL/4秒)推注。注射完成后,务必将针头在原位静置1分钟,然后缓慢拔出以防病毒液渗漏。
2.术后恢复
立即将小鼠转移至 37°C 的恒温恢复笼中,防止体温过低。
密切监测,直至动物完全清醒并恢复正常活动。
来源:丁香实验










