用途
适用范围: 直接将基因递送至肾脏细胞,用于研究肾脏功能、纤维化及相关疾病。
材料与仪器
术前准备: 称重后,为小鼠注射镇痛药(如美洛昔康)。
麻醉与固定: 麻醉后,将小鼠俯卧固定于手术台上,剃除一侧腰背部的毛发并彻底消毒。
工具与病毒: 准备好 Hamilton 注射器配 33G 针头,吸取 5-10 µL 的 AAV 病毒液。
步骤
1.病毒注射
暴露肾脏: 在腰背部作一个 1-1.5 cm 的纵向切口,钝性分离肌肉和脂肪,直至找到肾脏。
肾脏外置: 用湿润的棉签或弯镊,轻柔地将肾脏从腹腔中「钓」出,并稳定固定于切口旁。这是整个手术最关键的步骤之一。
显微注射:在显微镜下,将针头以约 30° 角 插入肾皮质 1-2 mm 深。极缓慢地注入病毒液(建议用时 30-60 秒),以最大程度促进组织吸收。拔针前,务必在原位静置 10-15 秒,防止液体回流。

2.复位、缝合与恢复
轻柔地将肾脏放回腹腔,然后分层缝合肌肉与皮肤。术后立即将小鼠置于 37°C 加热垫上,并按计划给予镇痛和补液,直至其完全恢复。
来源:丁香实验










