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答：建议用TRIzol提取总RNA，DNase I消化基因组DNA，逆转录后qPCR检测。关键：设计跨内含子引物或3'UTR引物区分mRNA与DNA；设无逆转录对照排除DNA污染。仪器：NanoDrop测纯度，qPCR仪定量。易错点：RNA降解、引物设计不当。

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答：cf-DNA 提取建议使用专用游离核酸采血管并尽快分离血浆，采用柱式或磁珠法富集短片段；cf-mtDNA 定量需设置线粒体特异引物并做绝对定量标准曲线。

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答：1. 包被：PLL/PDL、层粘连蛋白失效、浓度不够、包被后没充分晾干、洗板不当，基底抓附力不足，细胞挂不住。2. 细胞解离损伤：消化时间过长、酶浓度偏高；吹打时力度大、枪头没抛光，剪切损伤神经元，细胞活力下降，就算种下去也很快飘起。建议消化3–5min，看到组织松散就终止，吹打轻柔、次数控制住，可加DNase减少DNA黏连成团。3. 接种操作：接种密度偏低是很常见原因；悬液加板后反复晃动、频繁挪

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答：建议用TRIzol提取总RNA，DNase I消化基因组DNA，逆转录后qPCR检测。关键：设计跨内含子引物或3'UTR引物区分mRNA与DNA；设无逆转录对照排除DNA污染。仪器：NanoDrop测纯度，qPCR仪定量。易错点：RNA降解、引物设计不当。

答：A、B是小鼠颈淋巴结解剖图大致位置

答：一、染色原理与显色效果天狼星红染色原理：天狼星红是一种强酸性染料，通过静电作用与胶原纤维中的碱性基团（如赖氨酸、羟脯氨酸）结合。染色后，胶原纤维呈红色，肌纤维呈黄色，细胞核通常用苏木素复染呈蓝色715。显色特点：在偏光显微镜下，胶原纤维可呈现双折光现象（Ⅰ型胶原呈黄色或红色，Ⅲ型胶原呈绿色），从而区分胶原类型1015。Masson三色染色原理：通过多种染料组合（如酸性品红、苯胺蓝）对不同组织成分进

答：分离胶浓度的选择 分离胶的浓度主要依据目标蛋白的分子量来确定。蛋白分子量越小，所需的分离胶浓度通常越高，以便更好地分离和分辨小分子蛋白。常见的分离胶浓度包括4%、6%、8%、10%、12%等，不同浓度的分离胶对应不同的最适蛋白分子量范围。 4%分离胶：适用于较大分子量的蛋白质，但一般不常用。 6%分离胶：适用于中等至较大分子量的蛋白质，如10-200 kDa。 8%分离胶：适用于较小分子量的蛋白质

答：可以参照这篇硕士论文《基于PI3K-AKT通路探讨泽泻醇A改善脑微血管内皮细胞氧糖剥夺损伤的机制研究》和博士论文《LIPUS联合SonoVue对肾小球内皮细胞的影响及机制研究》通透性检测方法步骤如下：将细胞接种于含0.4 um 孔聚碳酸酯膜的6.5 mm Transwell小室，培养Sd至细胞融合，进行OGD 处理，再予以不同含药培养基复氧，CO2继续培养24 h。然后将上室培养基更换为含20 u

答：要放标尺，标尺和放大倍数的关系为：标尺每一格代表20μm；100x标尺每一格代表10μm；200x标尺每一格代表5μm；400x标尺每一格代表2.5μm；500x标尺每一格代表2μm；1000x标尺每一格代表1μm。放大倍数的测量是动态的，随着显示图像的大小不同，需要时就测量。标尺的作用就在于这里。

答：在使用小动物活体成像（IVIS）仪器进行荧光成像后，可以使用图像处理软件（如Living Image®或ImageJ）对荧光图像进行分析和统计。具体来说，可以使用软件中的工具来测量感兴趣区域（ROI）中的荧光强度，并将其与对照组进行比较，以确定荧光信号的增强或减弱。还可以通过分析ROI中的荧光强度分布和大小，来获得更详细的荧光统计数据，例如最大值、平均值、标准差等。

答：A、B是小鼠颈淋巴结解剖图大致位置

答：一、染色原理与显色效果天狼星红染色原理：天狼星红是一种强酸性染料，通过静电作用与胶原纤维中的碱性基团（如赖氨酸、羟脯氨酸）结合。染色后，胶原纤维呈红色，肌纤维呈黄色，细胞核通常用苏木素复染呈蓝色715。显色特点：在偏光显微镜下，胶原纤维可呈现双折光现象（Ⅰ型胶原呈黄色或红色，Ⅲ型胶原呈绿色），从而区分胶原类型1015。Masson三色染色原理：通过多种染料组合（如酸性品红、苯胺蓝）对不同组织成分进