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答:血清灭活通常采用56℃水浴30分钟,灭活补体成分。注意水浴锅温度要准确,血清完全解冻后混匀再放入,时间到后立即取出置于冰上降温。
答:建议改用Western blot或ELISA检测蛋白水平。若坚持IHC,可尝试:1)换用更高亲和力抗体;2)抗原修复(柠檬酸钠pH6.0或EDTA pH9.0,高压锅2min);3)延长一抗孵育(4度过夜);4)增强信号(TSA放大系统)。关键:设置阳性组织对照排除抗体问题。注意样本固定时间不超过24h。
答:可能是LPS浓度太高了,这篇文献: Acinar cell NLRP3 inflammasome and gasdermin D (GSDMD) activation mediates pyroptosis and systemic inflammation in acute pancreatitis 的农浓度才 400 ng/mL (0.4 μg/mL),高浓度的LPS会造成非特异性细胞毒性/死
答:CCK-8测的是细胞活力/增殖,测炎症不太科学呀。如果LPS只是诱导炎症(释放IL-6、TNF-α等)而没有大规模杀伤细胞,CCK-8是检测不到差异的。LPS浓度:从 0.1、0.5、1、5、10 μg/mL 开始(最大不超过10)刺激时间:3h、6h、12h、24h(炎症峰值在3–6h)血清:换液时用 无血清或1–2%低血清 培养基(避免血清中抗炎因子干扰)检测指标,改为:• qPCR测IL-6
答:A、B是小鼠颈淋巴结解剖图大致位置
答:一、染色原理与显色效果天狼星红染色原理:天狼星红是一种强酸性染料,通过静电作用与胶原纤维中的碱性基团(如赖氨酸、羟脯氨酸)结合。染色后,胶原纤维呈红色,肌纤维呈黄色,细胞核通常用苏木素复染呈蓝色715。显色特点:在偏光显微镜下,胶原纤维可呈现双折光现象(Ⅰ型胶原呈黄色或红色,Ⅲ型胶原呈绿色),从而区分胶原类型1015。Masson三色染色原理:通过多种染料组合(如酸性品红、苯胺蓝)对不同组织成分进
答:非常通俗的讲就是几个病毒对应一个细胞的感染。例如MOI=10就是你加入的病毒量是细胞数量的10倍。这样的感染剂量很容易立刻达到平台期。
答:分离胶浓度的选择 分离胶的浓度主要依据目标蛋白的分子量来确定。蛋白分子量越小,所需的分离胶浓度通常越高,以便更好地分离和分辨小分子蛋白。常见的分离胶浓度包括4%、6%、8%、10%、12%等,不同浓度的分离胶对应不同的最适蛋白分子量范围。 4%分离胶:适用于较大分子量的蛋白质,但一般不常用。 6%分离胶:适用于中等至较大分子量的蛋白质,如10-200 kDa。 8%分离胶:适用于较小分子量的蛋白质
答:如果是完整质粒,应该是超螺旋的,跑的最快。但是感觉你这个lane像是开环带,就是双链dna有一条断开了,拖着尾巴,跑的慢。lane2 是线性带,跑的比开环带要快。
答:每个24孔板一般每孔20w-40w左右
答:要放标尺,标尺和放大倍数的关系为:标尺每一格代表20μm;100x标尺每一格代表10μm;200x标尺每一格代表5μm;400x标尺每一格代表2.5μm;500x标尺每一格代表2μm;1000x标尺每一格代表1μm。放大倍数的测量是动态的,随着显示图像的大小不同,需要时就测量。标尺的作用就在于这里。
答:一般OD600=1时对应的细菌浓度为2*10^9cfu/ml
答:请问在IR阶段 只有一个review is ongoing是指只有一个审稿人吗 但是客服告诉我有两个审稿人
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