用途
适用范围: 高效、直接地将基因导入心脏组织,是心脏研究的常用技术。
材料与仪器
病毒与工具: 准备好稀释的AAV病毒液、已灭菌的 Hamilton 注射器及 30G 针头。
动物准备: 将小鼠麻醉(确认捏足无反射),保护眼睛,并对胸部区域进行剃毛和彻底消毒。
注射剂量: 通常为 30 µL,分多点注射。
步骤
1.开胸与心脏注射
开胸: 在左侧胸壁作皮肤切口,钝性分离胸肌,暴露肋骨。
暴露心脏: 小心刺穿第4肋间隙,然后轻压胸腔,使心脏部分外露并稳定固定。
多点注射: 将 30µL 病毒液分 3-5 个点缓慢注入左心室心肌壁。
心脏还纳与排气:立即将心脏还纳,并轻压胸腔排出空气,直至观察到肌肉搏动恢复。这是防止气胸的关键步骤。
2.缝合与术后恢复
用缝线缝合皮肤切口(肌肉层无需缝合)。术后立即注射镇痛药,并将小鼠置于 37°C 加热垫上直至完全苏醒。密切监护动物恢复状况,并每日检查伤口。

图片来源:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC5933510/
来源:丁香实验









