丁香通
丁香园
论坛
医药招聘
丁香医生
更多
调查派
用药助手
丁香搜索
医药数据库
来问医生
我要登录
|
免费注册
|
我的丁香通
企业机构:
成为企业机构
个人用户:
个人中心
移动端
搜实验
大家都在搜
大家都在搜
0 人通过求购买到了急需的产品
免费发布求购
搜索
发布求购
实验专区
实验库(10000+)
实验问答
实验专题
热门视频
前沿资讯
科研者之家
丁香通
>
实验专区
>
实验问答
>
全部
实验问答
28,212,119 科研人在看
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
保存细胞的细胞冻存管在使用之前需要灭菌吗?
赵小叶
冻存管没有开封之前应该都是无菌的哦 如果盖子开了就别用了吧 不能高压灭菌重复使用
2 回答
3465 围观
2 回答
3465 围观
去回答
问
有关细胞冻存后 - 80℃保存的问题
biopic
老老实实按照标准操作,存液氮里面。就不会出这种问题。
4 回答
15162 围观
4 回答
15162 围观
去回答
问
细胞冻存液是否对细胞贴壁有影响
好假哟00
不知道你复苏培养使用什么规格的瓶子,因为商品化冻存液中应该也有 DMSO,对细胞影响较大的也是这个成分。足量的稀释可以降低他的毒性。
2 回答
881 围观
2 回答
881 围观
去回答
问
细胞冻存液污染了,细胞怎么办
Doctor高1
如果冻存液污染,那你冻存的细胞肯定也被污染了,只能丢弃,因为污染的细胞你花时间金钱去补救,结果都差强人意
5 回答
915 围观
5 回答
915 围观
去回答
问
提取的蛋白保存后没有凝固呈水状的原因
是小杨同学
我觉得有可能是污染了,或者是冰箱温度的问题,建议放在-80°C冻存呢
28 回答
1846 围观
28 回答
1846 围观
去回答
问
关于-80度冻存组织的核蛋白提取的问题
小布丁瑶瑶
可以的,结果可能会不同,减少-80度的时间,结果应该会更相近一些
32 回答
7558 围观
32 回答
7558 围观
去回答
问
提取的组蛋白Histone3怎么定量?
dxy_h7vcp8v3
首先检测内参的抗体和你自己目的蛋白是不一样的,从内参和目的蛋白WB来看,说明你自己的蛋白胶及转膜体系都没有问题。就应该在不同的地方找原因,其一检查目的蛋白的抗体是否过期或者长杂菌 ;其二,检查目的蛋白提取所用buffer是否调节至中性PH值,是否其中缓冲液让蛋白质变性导致没有条带 ;其三建议检查下,自己第一次提出来呢过程中的关键试剂,是否在后边提取中做了更换,检查更换的试剂是否正确。
13 回答
827 围观
13 回答
827 围观
去回答
问
链霉亲和素融合蛋白的离子交换纯化相关问题
是小杨同学
我觉得可能标签有点问题呢,可以换一个标签试一下,或者我觉得可以在蛋白与标签之间加一个酶切位点,在过离子交换之前把标签给切掉
26 回答
729 围观
26 回答
729 围观
去回答
问
蛋白质在透析过程中有大量沉淀的原因?
是小杨同学
有可能是因为PH值,温度等引起的沉淀,也有可能是蛋白本身就不太稳定容易沉淀,可以超声或梯度透析试试看
21 回答
14672 围观
21 回答
14672 围观
去回答
问
蛋白结合为什么荧光公定位能做出来免疫共沉淀不行?
是小杨同学
我觉得可以试一下加大样本量呢,沉淀的蛋白量可能有多少,然后可以试一下优化ip条件
26 回答
1207 围观
26 回答
1207 围观
去回答
问
coip的对照相关的问题
是小杨同学
我觉得可能是input的浓度有点低了呢,或者是抗体的问题,如果是抗体的话可以跑wb去验证一下
25 回答
3605 围观
25 回答
3605 围观
去回答
问
CO-IP之后的蛋白质和磁珠分离的方法相关问题
小布丁瑶瑶
0.5-4微克/mg 总蛋白即可 一般抗体浓度都很高 1:200-1:500左右
29 回答
2787 围观
29 回答
2787 围观
去回答
问
input control是什么意思?
医往情深丁香园
就是裂解的蛋白原液,如果目的蛋白表达量正常,这个是很容易曝光出来的。
19 回答
995 围观
19 回答
995 围观
去回答
问
转膜后蛋白异常的原因?
是小杨同学
我觉得可能是电压有点高,导致蛋白质降解了,然后可以换个电转仪器试试看
31 回答
2130 围观
31 回答
2130 围观
去回答
问
GSTpulldown诱饵蛋白不结合柱子怎么办?
小布丁瑶瑶
可能是标签包起来了,可以尝试变性纯化
28 回答
1450 围观
28 回答
1450 围观
去回答
问
内参GADPH出现弥散,并且有两条条带是为什么?
是小杨同学
我觉得可能是你的蛋白降解了,然后出现了两条带,最好用新鲜的蛋白来跑胶呢
29 回答
7235 围观
29 回答
7235 围观
去回答
问
敷完二抗后可以隔夜曝光吗?有影响吗?
医往情深丁香园
可以隔夜曝光,一抗可以过夜敷隔日曝光都可以,二抗如果来不及当天曝光,不如就放在一抗里。
30 回答
11444 围观
30 回答
11444 围观
去回答
问
WB转膜SIRT1蛋白一直失败的原因?
医往情深丁香园
说明你抗体有问题或者目的蛋白表达量有问题。如果他的也转不过去。
24 回答
1506 围观
24 回答
1506 围观
去回答
问
wb一抗和二抗去除液的原理是什么?
小布丁瑶瑶
可以试着用一下膜再生液,等洗好后,再曝光看下还有没有条带,没有就可以孵育新抗体了
31 回答
12740 围观
31 回答
12740 围观
去回答
问
加入loading buffer煮沸后整个变红?
小布丁瑶瑶
可能是蛋白质酸性太强了,可以检测一下样品或ph值
31 回答
2820 围观
31 回答
2820 围观
去回答
1
•••
824
825
826
827
828
•••
1009
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
领取干货资料
反馈
TOP
打开小程序