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        敷完二抗后可以隔夜曝光吗?有影响吗?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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        丁香实验

        二抗孵育结束后可以隔夜曝光吗?需要重新再敷二抗吗?

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        30 个回答

        user-title

        医往情深丁香园

        有帮助
        可以隔夜曝光,一抗可以过夜敷隔日曝光都可以,二抗如果来不及当天曝光,不如就放在一抗里。
        user-title

        是小杨同学

        有帮助
        可以隔夜曝光的,但是最好不要这么做,在tbst里面浸泡时间太长的话,有可能会让条带不清的
        user-title

        内科小护士

        有帮助
        可以隔夜曝光的。以前试过,孵完二抗,没时间曝光可以浸泡放4度,第二天曝光,效果差不多。
        user-title

        lzy必有我师

        有帮助
        可以隔夜曝光,样品不要反复冻融,煮样时间也不要太长
        user-title

        dxyhsx123

        有帮助
        敷完二抗后洗干净,挡在TBST里面,可以第二天曝光,如果本身蛋白少,亮度低的话,不建议这么做。
        user-title

        兔子爱吃鱼

        有帮助
        试过一次隔夜曝光,好像影响不大,是可以曝光出来的
        user-title

        dxy_9kptsiw

        有帮助
        试过,可以,但是不建议。 如果可以还是尽快显影
        user-title

        dxy_50tk4bh8

        有帮助
        可以的,但是可能结果会不是很好。图可能没那么好看了。
        user-title

        一支肾上腺素

        有帮助
        没有问题,不过应避免反复冻融,可以在4度保存,一般重复回收使用2-3次是没问题的。
        user-title

        zxb597

        有帮助
        在TBST中浸泡时间过长,可能导致条带不清,影响结果。
        user-title

        dxy_h7vcp8v3

        有帮助
        可以隔夜曝光,最好把膜泡在TBST或者清水里。不用再次敷抗体。
        user-title

        dxy_w4oj7yoe

        有帮助
        如果把膜一直泡在PBST或TBST里放在4℃的话,对酶应该是没什么太大影响,有可能整体信号会稍弱一点,如果曝不出来可以再敷一下二抗。另外就是保存的时候一定要把二抗洗干净,二抗时间太长背景会很高
        user-title

        dxy_pggo2lp2

        有帮助
        是可以的。但是在TBST中浸泡时间过长,可能导致条带不清,对结果有影响。如果条件不允许,建议将条带在TBT中4℃保存。
        user-title

        JCorona

        有帮助
        最好不要隔夜,因为大多数标记物都是酶,不冷冻保存的话容易变性,同理,一抗二抗和目标蛋白都是蛋白质,也容易降解、变性,而孵育过后的膜不宜冷冻,冰晶可能破坏其微观结构。一旦膜的结构被破坏,或者任何一个蛋白变性,再孵育二抗也无济于事,所以还是推荐孵育完二抗后立即曝光。
        user-title

        于小闹0808

        有帮助
        是可以的,用TBST泡着,保持在4℃保存
        user-title

        ZZDX-YILILI

        有帮助
        二抗敷育完尽量接着曝光,如果实在没有时间可以过夜曝光,但尽量放到0.05%TBST中,4℃中保存。
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        jey1235

        有帮助
        都隔夜曝光了,信号还能相信吗?非特异性信号都出来了。如果检测如此困难,建议建议重新设计实验,隔夜曝光着实不可取。
        user-title

        dxy_pni5ki46

        有帮助
        不太好,时间长了hrp活性会减弱,重新孵育二抗并不能结合上了,除非用抗体剥离液去除后重新孵育
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        z流沙z

        有帮助
        可以洗完膜放4°,到时候直接测,不用重新孵
        user-title

        dxy_qkedgrg7

        有帮助
        可以,之前我做的时候孵完二抗放两天都没什么问题,不影响的
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