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- 2026年05月27日
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文献和实验(Ser473)(193H12)Rabbit mAb，1:300,稀释，二抗是驴抗兔，1：2000，我是实验室的新手，刚呆俩月，受 此挫折，一头雾水，请过来人或者有经验的同学帮忙解答怎样解决，非常感谢！ 碧峤 pAkt有两个位点，Ser473和Thr308，其中Ser473相对容易显色。如果显色失败，可能的原因:1 上样量过少，我们一般都是30μg；2 一抗孵育时间过短，我们一般24h~48h；3 一抗是否工作有待排除 米宝
：使用 Anti-phospho-Akt (Ser473) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。（图 A）使用免疫组化试剂盒M&R HRP/DAB Detection IHC Kit，抗体 1:100 稀释；(图 B) 采用普通免疫组化试剂盒，抗体 1:25 稀释。 图 6 免疫组化实验检测 Erk1/2 表达 注：使用 Anti-Erk1/2 Mouse mAb与p44/42 MAPK （Erk1/2）Rabbit mAb 对正常小鼠心脏组织进行免疫
过程中，一抗应在封闭缓冲液 (TBS/0.3%Triton. X–100/5% NGS) 中稀释。抗体：Phospho–Akt (Ser473) (D9E) XP. Rabbit mAb #4060、Phospho–EGFReceptor (Tyr1173) (53A5) Rabbit mAb #4407样本：石蜡包埋人类乳腺肿瘤（上图）和 HCC827 异种移植物（下图）抗体稀释：SignalStain. 抗体稀释液（左）或 TBST/5%NGS（右）检测—检测系统传统的 IHC 检测
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