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问
求助,WB曝光出来整张膜都是黑色,同样条件的内参就还能看
府宅
一抗和二抗浓度降低,TBST多洗几遍看看是否改善
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问
求助,为什么我的SDS跑蛋白脱位那么长🙏
Eason老歌迷
拖尾现象是电泳中最常见的现象,这常常是由于样品溶解不佳引起的,解决的办法是在加样前离心,选用合适的样品级冲液和凝胶缓冲液。或者是降低凝胶浓度。
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问
TGF诱导HK-2,48h后细胞掉了,求大神指教
Eason老歌迷
如果要是正常组也死掉了,可能就是你细胞培养的问题,是不是培养基问题,或者是传代细胞老化了。
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问
WB实验
Eason老歌迷
你这可能是非特异性条带,可以选一个特异性比较高的抗体,或者是你封闭时间久一点。
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问
tunnel凋亡试剂盒的使用
balalaLy
tunnel跟你要染的一抗二抗是两个实验,一般做tunnel都会单独做,因为不好染,假阳性多,你再加染个一抗,步骤有多了,相互影响。及时一起染,也是先染一抗二抗,后面再染tunnel
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问
死活染颜色的固定了之后可以保存多久
此用户已注销
如果不能及时上机检测,可将已经染色的细胞在1-4%的多聚甲醛中4℃固定30min,清洗细胞,之后用适量的Stain Buffer重悬细胞,4℃避光保存。固定的细胞需要尽快上机检测一般不应超过72h。前面已经做过类似固定步骤(例如固定破膜)的细胞如果能确保24h内上机,实际上无需再次固定。如不能,推荐再次固定以稳定胞内抗体的结合。
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问
同等条件下免疫荧光染色为何有组织无荧光或荧光差异?
Eason老歌迷
虽然是一起做的,但染色过程不是同时进行,还是有差异的吧,可能有的样本染上色了,有的就没有染上色。
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问
抗原修复后DAB无显色
申东熙老伯
背景都没有片子都白了就是脱片。抗原修复结束一定要冷却。
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问
免疫荧光切片是否可以用流式抗体染色?
Eason老歌迷
流式抗体比较容易淬灭。做免疫荧光的话,在同等条件下,当然选择做荧光抗体啦,但实在没有,流式抗体还是可以用的,不过最好马上去荧光显微镜下看结果,时间长了不是很好。我用过流式抗体做荧光染色,效果还可以。
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问
多重免疫荧光出现通道串色的情况,如何降低串色跟非特异性荧光着色!
陈皮712
1. 选择波长差异较大的染料;2. 在仪器上调好校正,或者在流式相关软件上进行调整(如flowjo的校正矩阵);3.关于非特异性着色,首先细胞跟抗体孵育后,充分用PBS清洗,并选择着色特异性较好的抗体品牌,必要时染完一种色后进行封闭处理。
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4523 围观
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问
多糖的免疫调节活性,有几点问题?
Eason老歌迷
你就可以参看这篇文献,这个综述讲的很详细。“分子修饰对多糖免疫活性影响的研究进展”分享给你。
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问
石蜡包埋,蜡块出现裂纹
Eason老歌迷
可能是你的蜡的韧性不好。你可以加少量的蜜蜡;或者将一般石蜡反复融解、凝固,直到蜡由白色变成微黄色为止。处理好的蜡有韧性,在漂片时可以抻得很舒展,那些微小的皱褶几乎都能打开。
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2635 围观
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问
Invitrogen Mitotracker DeepRed染色求助
balalaLy
我们也是用的invitrogen的mitotracker 染的,按照说明书染的效果,用的奥林巴斯显微镜100倍镜
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936 围观
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问
4T1细胞复苏后贴壁形态和Atcc上细胞图不大一样,请大神指教!急
balalaLy
4T1细胞就是这样喜欢叠着生长
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问
细胞反复复苏反复污染,有没有解决办法呀,头疼,也不知道是什么污染,传2-3代,细胞
陈皮712
先检查培养箱、培养基、耗材(培养瓶等)是否有污染,细胞实验操作是否规范。反复冻存复苏恐怕不能解决污染问题,并且还会给细胞带来巨大的伤害。如果是贴壁细胞,可尝试以下方法:先将细胞消化下来,加入20%双抗完全培养基(10ml培养基+2ml双抗)终止消化并重悬,浸泡10分钟,1000rpm离心5分钟,弃上清。再加入20%双抗PBS清洗(10mlPBS+2ml双抗),1000rpm离心5分钟,重复2次。随
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580 围观
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问
求助|Lmh细胞状态问题 培养基两天变黄但不浑浊 同样培养基传代的DF-1没问题
Eason老歌迷
可能是有污染。还有就是可能是你的细胞浓度太高,也可能是引起细胞培养基很快变黄。
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问
CCK8对照组细胞存活率
Topmicro
做的平行对照吧,多次重复实验总会有误差
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3458 围观
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问
耐药基因分型分析
Eason老歌迷
可以用NCBI的blast去分析。你的匹配度不到100,可能是由于自身扩增时问题导致测序结果出现异常。
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847 围观
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问
各位老师来指点一下
Eason老歌迷
如果共定位也不正常,那就说明染错了,没事我之前也遇到过这种情况,这个就需要你一点点排查了,是不是你选的细胞就不太合适呢?
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430 围观
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问
这是血液中什么细胞?
陈皮712
这是直接离心后得到的血细胞还是经过淋巴细胞分离液处理的血细胞?图片不是很清晰,看起来像巨噬细胞,尤其像打过升白针后的患者的外周血的单核/巨噬细胞。肉眼看只能大概,如果要明确细胞类型,需要做流式分析。
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