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问
关于PCR,德塔CT值的问题,采用ARMS-PCR法但按照说明书需要判读德塔CT,这个德塔CT值的意义是什么呢
Eason老歌迷
我们都是用2的负ΔΔct值次幂来判断qpcr的结果,不用Δct值,Δct值是目的基因组减去内参组。
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问
跑胶拖带
whilt-shirt
有可能是模板出了问题导致没P出来
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问
电融合失败的细胞还可以进行手动融合吗,电融合会不会对细胞产生影响?
Eason老歌迷
电融合失败的细胞还可以进行手动融合,电融合会对细胞产生影响,但是你只要操作得当,并没有太大影响。
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问
求助🆘 有无大神讲解一下大鼠巨噬细胞抗体抗体ED1和ED2
Eason老歌迷
你查了这四种抗体的说明书吗?看文献里它们用什么抗体比较多呢?我觉得ED1和ED2,可以用CD68,CD163代替。ED1和ED2在做大鼠三叉神经冰冻切片免疫荧光时需要破膜通透处理。ED1是表示总的巨噬细胞。ED2是表示组织驻留型巨噬细胞。
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问
蛋白表达
whilt-shirt
有可能是未裂解完全,建议重新裂解试试
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问
内皮细胞Cd31免疫组化染色
Eason老歌迷
石蜡切片脱蜡至水。3%H2O2室温孵育5~10 分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。蒸馏水冲洗,PBS 浸泡5 分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。5~10%正常山羊血清(PBS 稀释)封闭,室温孵育10 分钟。倾去血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2 小时或4℃过夜。PBS 冲洗,5 分钟×3 次。滴加适当比例稀释的生物素标记二抗(1%BSA-PBS 稀释),
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问
冰冻切片在沉糖过程中用的30%的蔗糖不小心用蒸馏水配置了,
balalaLy
dd水和pbs我都试过,好像没什么影响,都能做出相似的结果
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问
求助:如何用计数法测细胞生长曲线
whilt-shirt
这种情况还是选用培养瓶或者培养皿吧
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问
WB结果
bamboopiggy
1.分装时要混匀,2,你上样的枪尖可能有差异,3,胶配的有问题,4,转膜有问题。5,抗体加的不匀
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问
【求助】WB的抗体--氨基酸末端抗原
Eason老歌迷
没啥影响,可以正常购买。你可以去一个专门对比抗体的网站查看,或者去文献里查看他们都用的什么类型的抗体。
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问
免疫组化结果
申东熙老伯
可以试着提高一抗浓度,加长染色时间。
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问
LTBR阻滞剂
Dr_劉医生
竞争性结合位点,一个抗原抗体结合,一个补体途径结合,应该通路,比如SSSLTBR-IgBaminercept阻断LTa1b2和LIGHT信号通路原发性干燥综合征
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问
agonistic mAb和普通单克隆抗体的区别
朱芮reda
可以混用,一个单抗,一个单抗抑制剂
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问
【求助】PBMC培养污染?
此用户已注销
培养基白色絮状物是在培养基配制完成后没有及时包扎灭菌,是微生物作用所致,也是培养基不同成分之间发生反应所致。总之,培养基配制过程中就需要打开灭菌锅了,尽快灭菌,就不会有白色絮状沉淀了。
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问
融合蛋白提问
bamboopiggy
你最好是在n端连GFP或者则就是c端去掉跨膜区以后,连GFP,否则,GFP可能检测不到。
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问
ip实验
冷泉港蛋白
你搜下,之前讨论过相关问题。涉及到蛋白互作研究的几个层次
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问
免疫共沉淀怎么才能去除IgG重链和轻链的条带?
冷泉港蛋白
1.首先看下原理:你可以选择原理二的试剂盒,看看是否可以解决你的问题2.调整胶浓度,或更换其他缓冲体系的PAGE,使轻链与目的条带分离开。3.就是调整抗体的种属了,不讨论了。4.应该有那样一种二抗,与变性的一抗不反应,只与天然的一抗反应,市场应该有吧?
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问
免疫荧光实验出现杂点?
junyong151
常见的原因其他老师都提到了,还有一点就要考虑一下自己所用的洗片子的溶液是否有结晶等东西造成了这种非特异性的染色,我们可以过滤一下溶液,看看是否可以去除这些杂质。
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问
请问ELISA试剂盒检测MAC-T饥饿处理后的细胞培养上清,为什么无法计算出酪蛋白浓度?
冷泉港蛋白
是不是试剂盒有问题?1.查下你买的试剂盒是否有引用文献 2.做个wb看下,抗体应该不贵
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问
请问小鼠带早起胚胎的子宫切片哪里可以购买到?
dxy_e21m06hw
我有,不过是自己做出来的,结果也很好,你需要吗
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