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问
做荧光补偿和电压调节有什么需要注意的地方吗?
此用户已注销
调节补偿时,一定要先调节好电压参数,才能调节补偿,补偿调节完成后,电压参数不能改变,若是免调电压的仪器则不必这样
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问
免疫荧光定抗体GABA
此用户已注销
可以、细胞免疫荧光想染GABA,买抗体买Anti-ABAT/GABA-T是可以的哟
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问
去除刺激源后的m2巨噬细胞稳定吗
此用户已注销
可以参考文献1. JoVE. June 2013 2. Sci Rep. 2020THP-1细胞向M1,M2的极化
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问
组织放多久还可以做流式
WolfgangX7YL
要分活细胞的话最好立马做吧,冻了-20或者-80或者液氮都影响蛮大的,原则就是尽快做,在做之前都放在4度
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问
求助:包装腺相关病毒
Dr_劉医生
不是必须的,可以用HEK293;先是用常规的方法培养HEK293细胞,传代后24 h后,用购买的Lpotectamin 2000协助重构的质pAAV—MCS及AAV HelpeFreesystem中的其他两种辅助质粒pAAV—RC及pHelper共转染HEK293细胞,培养72 h后,用X—gal染色系统检测质粒转染的效果。用物理方法破碎细胞后,提取病毒悬液,用分光光度仪检测260nm的A值来评价
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问
肺癌细胞造的转移模型,用什么抗体指标做免疫组化还是免疫荧光可以确定转移部位的细胞
你好几和户
F1,TTF1阳性代表的是肺来源,KI67是主要看增长指数,其他HER2,KRAS或者P53、CK都证明来源。
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问
跪求幽门螺杆菌SS1菌株及培养技巧
Dr_劉医生
1. 先将适应菌株SS1和初始菌株10700菌株接种于含50mL/L绵羊全血的哥伦比亚琼脂平板上, 平板中含有两性霉素B 200 mg/L、多黏菌素B 200 mg/L、万古霉素250 mg/L、TMP 300 mg/L. 2. 平板置于50 mL/L O2, 100 mL/L CO2, 850 mL/L N2的微需氧气体环境中37℃培养48 h后3. 取出平板后刮取菌苔, 用8.5g/L的NaC
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LDH释放实验中的HLA分子抑制剂选择
你好几和户
可以选下面这些的Sodium oxamate,AZ-33,GSK 2837808A
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问
做免疫荧光一抗是标签抗体,非特异性太多怎么办
冷泉港蛋白
1.如果用的是His标签抗体,特异性是比较差的,想调整的话,难度比较大,抗体本身特异性不好。因为是6*his。3*his、1*his可能都会反应。2.如果用的是Flag标签抗体,挺好用的。可以调整下浓度和洗脱液。如果不行,换个进口抗体试试。
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问
请教:coip实验IgG组出现阳性结果是什么原因?
你好几和户
简单说anti-A的抗体由特异性的识别A蛋白的Fab片段和IgG片段组成。但是anti-A抗体有可能有非特异性结合,这些就是背景。而IgG的阴性对照的引入就是为了消除这个背景。如果实验结果正确,那么“实验组”的条带应该比“阴性对照组”亮很多。
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问
高通量测序甲基化修饰的问题
你好几和户
m6A RNA甲基化建库测序的原理是通过抗体特异性结合m6a修饰位点,再通过免疫共沉淀反应将m6a RNA甲基化片段富集,再进行建库测序即可完成在全转录组范围的m6a位点检测。宏基因组不包含对某个特定微生物种群的靶向,即不会对微生物特定种群进行单一性测序(真菌、细菌或者病毒),而是所有微生物基因组的总和。
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问
有淋巴细胞做抗原实验
此用户已注销
可以参考文献Guidelines for the survival bleeding of mice and rats.(2010).
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问
提取患者标本RNA
illusio
1.用小量提取多处理几个样品,合并后浓缩一下,或者冻干浓缩一下;2.尝试强力裂解液CLB,并且加大处理量,比如加大10倍处理量,然后用几个基因组先清除后,把所有的上清加到一个吸附柱上去,就能提高浓度
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问
LDH凋亡
你好几和户
1、LDH基质液的配制,2、靶细胞的传代(YAC-1细胞)3、脾细胞悬液的制备(效应细胞)4、NK细胞活性检测这些步骤
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救助|本科科研萌新,纯化的蛋白大小与预期大小不符
冷泉港蛋白
有下面几个原因:1.如果是蛋白降解,在36KD应该有条带,你仔细观察下,看看有没有。比较下未诱导和诱导的差别2.可能是序列中间有终止密码子,你看下测序结果。3.这种分析,最好有图
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求助引物设计实验中要找细菌的特征性序列的步骤
Topmicro
你所说的细菌特征性序列是指特定种属还是特定菌株?特定种属的话可以直接找论文看大家用的比较多的。特定菌株的得需要全基因组测序你自己比对查找了。
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请问ELISA试剂盒检测MAC-T饥饿处理后的细胞培养上清,为什么无法计算出酪蛋白浓度?
illusio
对于目的蛋白浓度特别低的样本,可以尝试用高敏ELISA,但这也并不意味着一定能检测到样本浓度,只能说可以提高样本的可测率,并使结果更加可靠。因为通常用普通ELISA检测的样本OD值都偏低,而高敏ELISA可提高样本OD值,使之尽量位于标曲范围内,得到的数值也更加可信。
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问
求助🆘
你好几和户
小鼠中枢神经系统存在多种巨噬细胞,有小(神经)胶质细胞(CD11b+CD45lowF4/80+)和单核细胞衍生的巨噬细胞(CD11b+CD45hi)。单核细胞衍生的巨噬细胞继续细分的话,包括:血管周围巨噬细(CD11b+CD45hiF4/80+CD163+CD206+)脑膜(CD11b+CD45hiF4/80+CD163CD206+)脉络从巨噬细胞(CD11b+CD45hiCD163-MHCIIh
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双荧光素酶实验问题求助!
你好几和户
最经典的仪器就是Promega的GloMax 20/20 发光检测仪,但这种仪器只适合一次检测。但也可以用多功能酶标仪来检测啦。
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关于人T细胞的Transwell实验
Eason老歌迷
之前做过。在文章中总看到用染结晶紫的方法和对下室的细胞计数这两个办法,但是师兄让我选的是对下室细胞计数,我觉得实验结果还可,你可以试一试。
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