细胞反复复苏反复污染，有没有解决办法呀，头疼，也不知道是什么污染，传2－3代，细胞

先检查培养箱、培养基、耗材（培养瓶等）是否有污染，细胞实验操作是否规范。反复冻存复苏恐怕不能解决污染问题，并且还会给细胞带来巨大的伤害。如果是贴壁细胞，可尝试以下方法：先将细胞消化下来，加入20%双抗完全培养基（10ml培养基+2ml双抗）终止消化并重悬，浸泡10分钟，1000rpm离心5分钟，弃上清。再加入20%双抗PBS清洗（10mlPBS+2ml双抗），1000rpm离心5分钟，重复2次。随后配制含10%双抗的完全培养基，重悬细胞，再铺瓶，放入培养箱中培养24小时。24h后观察细胞是否仍有污染，如无污染，可以更换为普通完全培养基培养。如污染仍存在，重复上述过程。可视污染类型加入双抗、三抗、红霉素等不同抗生素，操作过程同上。

有可能是培养箱或者细胞间污染了，建议消毒后重试

反复出现污染，需要检查操作人员的无菌操作技术，检查相关培养基与试剂是否为操作者个人专用，检查操作者的清洁情况：包括培养操作前后是否洗手；是否更换实验服；是否扎好头发；进行细胞培养时是否严格按照无菌要求佩戴实验服具（包括实验服、口罩、防尘帽、手套等）。若污染还是反复出现，问题往往出自使用试剂，需立即进行检查。