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简并引物扩增抗体基因后测序
Eason老歌迷
建议你测序的时候还是用两个引物双向测序。
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问
细胞内吞
Eason老歌迷
查看了一下相关文献,确实是37℃抗体被内吞了,而不是所谓的从细胞上掉下来了,所以放心做吧
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问
学习睾丸网注射腺病毒,有做过的同学知道睾丸网注射的具体位置和技巧吗?
府宅
小鼠睾丸注射的实验步骤:1.麻醉小鼠:40-80mg/kg,注射时浓度一般为0.5%,腹腔注射。2.调节显微操作台的操作臂,将玻璃针尾部用打火机熏烤一下,装进操作臂内,旋好固定旋钮。3.小鼠昏迷后,用胶带固定四肢于硬纸板上。4.备皮:剪去小鼠腹部的毛。注意:剪下的毛妥善处理,勿污染小鼠腹腔。此步骤可不做5.开腹:逐层打开腹腔,表皮至肌层。6.将睾丸拉出腹腔:于膀胱旁边寻找与睾丸相连的脂肪垫,轻轻拖
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问
BT474
Eason老歌迷
遇到过一次,我觉得并不一定是细胞形态变异,可能是传代的时候细胞受损发生老化,它就生长不好。
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问
求助基因问题
Eason老歌迷
之前看到过这方面的研究的论文,可以分享给你,讲的很详细”胰岛素受体基因突变的研究”。
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问
Co-IP 泛素化条带
Eason老歌迷
没有出现拖尾条带,而是单一条带,你是不是抗体用错了啊?至于泛素化质粒的构建你可以参看这篇文献,我也是按照这个方法来的“强制泛素化乙肝病毒核心抗原融合基因表达质粒的构建”
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问
有没有大佬看过新生乳鼠的脑细胞,电镜下的自噬?
Eason老歌迷
看过,你如果想参看这篇文献”新生鼠脑缺血缺氧致脑白质损伤后细胞自噬的初步观察”
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问
三次elisa结果均不一致,之前没有出现或者这样的情况,阳性越来越少是什么原因
Eason老歌迷
三次用的都是一批次的试剂吗?不同厂家的试剂一定不能混用,包括底物和洗涤液。由于校准标准有差异,还有抗体、检测方法、试剂、交叉反应等因素都会导致对样本的检测结果不一致。同时要注意试剂的批号和出厂日期,虽然试剂的有效期多为 1 年,但随着时间越长,试剂盒里的有效成分会有一定的衰减,尽量选择离出厂日期较近的试剂盒。
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问
PBMC的CD107a检测方法
府宅
有些组织有自发荧光的,这会造成本底高
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问
细胞染菌了有没有办法可以救,为什么有些时候加了三四倍双抗半天换一次液还是救不回来?
Eason老歌迷
一般染菌了,都不太好处理,建议你还是重新复苏培养一批吧,千万不要把培养箱的其他细胞给污染了。
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问
一星期的缓冲液换了之后胶还是很乱
Eason老歌迷
你既然换了缓冲液,还是很乱说明不是缓冲液的问题,可能是你的胶没配好。
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问
跑完电泳后缓冲液为什么不是均匀的烫
Eason老歌迷
是不是电流太大了,导致的电泳液很热?我们一般温度都不高啊。
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问
请问抗体需要现定制,没有成品的,可靠吗?
Eason老歌迷
是的,我们实验室有几个抗体就是这样的,你只要找的公司靠谱就可靠。
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问
幽门螺杆菌SS1培养
Eason老歌迷
如果你要是总是染菌,我觉得可能是你的操作问题,一定是要注意无菌操作,然后你的培养基什么的都要过滤。
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问
细胞相关
Eason老歌迷
我建议你提前将该蛋白与抑制剂共孵育再加入到细胞内,然后加完就进行实验。因为有时候细胞是受刺激完很短时间内会分泌你想要测的蛋白,然后很快就降解了。
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问
求助:为什么肺损伤模型小鼠体重一直下降?
麻黄连翘赤小豆
小鼠体重太轻了,耐受性降低,损伤模型就是会掉体重,术后的护理也很重要
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问
20g小鼠眼球采血只有不到0.6ml 分离血清只有100ul多,请问有什么更好的采血方式呢?
Eason老歌迷
摘眼球取血,是大家常用的方法,简单、易操作,取血量大,当然缺点就是过于残忍还有就是心脏采,用1毫升的针管,也能采到将近1毫升,当然需要练练第三,可以麻醉了以后(用乙醚就可以),腹主动脉取,也用1毫升的针管子,采血量也很大。
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问
求助,想原核表达溶菌酶基因,该选择哪种类型的BL21感受态?
Eason老歌迷
原核表达溶菌酶基因可以选用dh5a,因为dh52是用于克隆的,构建质粒,建库,保藏质粒。
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问
请问奶牛乳腺上皮细胞在有血清培养环境中,培养基中酪蛋白浓度随时间的增加会如何变化
Eason老歌迷
奶牛乳腺上皮细胞在有血清培养环境中,培养基中酪蛋白浓度随时间的增加,会先维持一段时间不变,然后慢慢下降。
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问
求助 SH-SY5Y细胞系
Eason老歌迷
我有。sh—sy5y细胞系又叫人神经母细胞瘤细胞。据报道,该细胞的密度可高达1×106 cells/cm2,具有中等水平的多巴胺β羟化酶的活性。
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