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免疫组织化学 (IHC) 通过抗原-抗体反应对组织切片中的特定蛋白进行原位示踪，是当代病理诊断的基石技术。在肿瘤学领域，IHC 检测肿瘤标志物，已成为现代病理诊断与研究不可或缺的工具......

环特生物构建了一系列常用罕见病模型，形成了“基因编辑建模 → 斑马鱼初筛 → 类器官验证”的全链条研究体系，为罕见病药物筛选、致病机制研究及基因治疗探索提供科学的评价工具及科学依据。

从机制到科研热点，新手也能快速入门

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在 WB（Western Blot）实验中，Marker 位置出现来自邻近泳道的「串色」或「杂带」，通常被称为泳道间交叉污染（Cross-contamination/Lane bleed-through）。主要是由于样本在电泳过程或转膜过程中发生了侧向扩散造成的。

细胞培养干货

siRNA实验从入门到精通：合成与转染的那些“坑”你踩过吗？

不只是 PD-1：CD96 正成为免疫治疗的下一个“必争之地”

养细胞 = 开盲盒？细胞培养总踩坑，不同细胞的"脾气"差太多！今天把实验室大佬们疾病课题相关的16 种常见细胞的「避坑手册」扒来了！

一项发表于 《EMBO Molecular Medicine》 的研究，用斑马鱼代替人生病，来快速验证基因变异的致病性，这不仅解决了两个新生儿的诊断难题，更为罕见病精准诊断开辟了新路径！

尽管 KEGG、REACTOME 等数据库已系统收录了大量已知代谢反应，越来越多的证据表明，我们对活细胞中真实运行的代谢网络的理解仍仅触及“冰山一角”。

细胞污染小课堂

T细胞是适应性免疫的核心，在抗肿瘤和抗病毒反应中至关重要。在急性感染或疫苗接种后，T细胞可分化为效应细胞并形成记忆细胞；而在慢性感染或癌症中，则易进入功能失调的“耗竭”状态。耗竭T细胞具有异质性，其中一部分具备干细胞样特性（如自我更新与分化潜能），对维持持久抗肿瘤免疫及免疫治疗响应尤为关键。近期研究深入揭示了调控T细胞耗竭与干性的分子机制，为通过干预这些通路增强T细胞免疫疗法疗效提供了新策略。

在流式细胞术中，对细胞内蛋白靶标进行染色通常需使用固定剂和破膜剂。固定剂用于稳定细胞结构、维持形态完整性，而破膜剂则在细胞膜上形成微孔，使抗体能够进入胞内结合目标蛋白。这一处理不仅有效暴露细胞内抗原，便于特异性染色与检测，还能保留已结合在膜表面蛋白上的荧光信号（如表面标记抗体），前提是选用兼容的固定与破膜试剂。合理选择固定破膜体系，对于同步分析细胞表面与胞内蛋白、实现多参数精细表型分型至关重要。

流式细胞术获取数据后，需通过科学的设门策略进行分析，以识别样本中的异常细胞群。数据分析涵盖单参数与多参数分析，其中设门是关键步骤，用于圈定目标细胞群体，排除干扰，从而准确判断细胞表型与功能状态，为疾病的诊断和评估提供可靠依据。

胰腺（Pancreas）是脊椎动物体内兼具消化与内分泌作用的重要器官，同时承担外分泌和内分泌两项核心功能。其主体结构为外分泌腺，主要由胰腺腺泡与导管组成，富含消化酶的胰液经由胰管被输送至十二指肠，实现对食物的分解消化。胰腺的内分泌部分则由大小不一的细胞团——胰岛构成，可分泌不同类型的激素来参与血糖水平的调控。胰岛包含多种细胞类型：分泌胰高血糖素以升高血糖的α细胞，分泌胰岛素以降低血糖的β细胞，分泌生长抑素并通过旁分泌来抑制α和β细胞分泌的δ细胞，分泌胰多肽来抑制胃肠运动、胰液分泌与胆囊收缩的PP细胞，以及分泌胃饥饿素的ε细胞。目前研究较多的是胰岛β细胞与α细胞。胰腺的正常功能对机体消化系统运转及新陈代谢维持均具有关键意义，其功能障碍会造成胰腺炎、糖尿病等消化代谢疾病。

胰管注射是一种用于谱系追踪、基因导入和细胞系特异性靶向重要技术。AAV8具有比较广泛的组织亲嗜性，因此利用AAV8来感染胰腺时，通常需要配合转导效率高的注射方式。胰管注射就是一种常用的选择。

一、前言植物细胞外囊泡（PENs），特别是具有药用价值的植物，中医上有天然的性味归经，具有靶向性药物递送潜力。但植物种类繁多、内含多种杂质、比较有提取难度，比如葛根、山药、石斛等。该指南将常见功效性植物按照「果实、花/叶、根茎、干品植物（花、根茎、种子）」进行分类，并加入大型真菌，分为五大类详细介绍前处理细节及产品推荐，特为有植物囊泡提取和研究需求的客户提供稳定实用的前处理建议。二、样本前处理指南1. 果实：如柠檬等。1）尽量选择新鲜果实，避开干瘪、发霉的果实，干果或果脯；2）出汁率：300~400 mL/kg；3）推荐榨汁机：手摇式碾磨榨汁机；4）果实质量参考：70 g 左右果实（不包括果皮），榨汁处理后得到 20~30 mL 原汁，按推荐试剂盒进行前处理后，浓缩 50 倍，最终可获得 400 μL 左右的植物囊泡。5）处理：① 薄皮果实洗净后，将果实切小块直接榨汁；② 厚皮果实（如柠檬）的果皮出汁量较低且含有大量杂质，需要去皮后切小块再榨汁。6）提取试剂盒推荐：宇玫博 UR5220 植物囊泡提取纯化试剂盒（多汁植物）。2. 花/叶：如玫瑰、芦荟等。1）尽量选择新鲜花/叶；2）出汁率

外泌体提取过程中，影响纯度的最大因素之一是杂蛋白，杂蛋白是令无数外泌体人为之头疼的痛点！杂蛋白来源于哪里呢？以 MSC 干细胞为例，在培养过程中的大量血清 (FBS)、人血小板裂解物 (HPL)、蛋白因子混合物的使用，这些都含大量外泌体杂质，其中一些杂质是蛋白因子，经过长期细胞培养也不会降解，增加了培养基的异源外泌体或者外泌体类似物，对于下游外泌体的制备带来诸多不可控的影响。如何解决杂蛋白问题呢？从实验设计的角度来说，在前端杂蛋白越少，意味着后端去除杂蛋白的方法和步骤越少，做过外泌体的朋友都知道，每减少一次纯化步骤，就能获取更多的外泌体，每增加一步，就会大幅度降低外泌体的得率。 比如超离得率 15%-20%、沉淀法得率 35%-40%，等等。因此，就 迫切需要一款无血清、低蛋白的化学成分确定的培养基 来满足 MSC 干细胞外泌体的上游细胞培养需要。其他的培养体系到底有什么问题？Fetal Bovine Serum（FBS） 一直是细胞培养的霸主，客户一般选用的培养体系是：普通 MSC 细胞培养基+FBS，营养是比较足的，但是对于外泌体研究却面临如下问题：1）胎牛血清里成分很多，生产工艺

间充质干细胞外泌体（MSC EXOs）近年来已经在伤口愈合、神经损伤、肝病以及新冠肺炎等领域被广泛研究应用。不少研究表明，在各种损伤和疾病模型中，MSC EXOs 可以作为间充质干细胞的替代选择。第四军医大学去年就在干细胞领域权威期刊Stem Cell Research & Therapy发表文章 [1]，发现 MSC EXOs 逆转肝纤维化，是间充质干细胞（MSCs）治疗肝脏疾病的重要机制。MSC EXOs 正逐渐成为再生医疗领域的「新武器」，也为临床疾病研究提供新思路。如何通过高纯度外泌体？加快研究速度外泌体相关研究越来越热，赛道也愈发精细，如何巧用外泌体，并让它服务于自己的课题呢？不论是 MSC EXOs 还是其他外泌体，高纯度提取一直是实验的前提。本文分享3 个影响外泌体结果准确性的因素，并给到大家详细的培养操作步骤参考，并总结操作过程中的4 个常见QA带你提升外泌体纯度。01 3 个因素影响外泌体结果准确性1. 血清：常规细胞培养使用胎牛血清 FBS + 基础培养基培养，但是胎牛血清中富含外泌体，后续培养后收集的细胞上清中的外泌体不确定是从细胞分泌的还是血清中来的，影