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500次(微孔)
Omni-Easy™即用型BCA蛋白定量试剂盒
Omni-Easy™ Ready-to-use BCA Protein Assay Kit
本产品冰袋运输; BSA标准品 -20℃保存,其它组分4℃保存,保质期12个月。
货号规格
goodZJ102L 500次(微孔)
goodZJ102L 500次(微孔)×5
产品内容
| 组分 | ZJ102 | ZJ102L |
| 试剂A | 100 mL | 100 mL×5 |
| 试剂B | 3 mL | 3 mL×5 |
| 即用型BSA标准品①( 0 μg/mL ) | 1 mL | 1 mL×5 |
| 即用型BSA标准品②(125 μg/mL) | 1 mL | 1 mL×5 |
| 即用型BSA标准品③(250 μg/mL) | 1 mL | 1 mL×5 |
| 即用型BSA标准品④(500 μg/mL) | 1 mL | 1 mL×5 |
| 即用型BSA标准品⑤(750 μg/mL) | 1 mL | 1 mL×5 |
| 即用型BSA标准品⑥(1000 μg/mL) | 1 mL | 1 mL×5 |
| 即用型BSA标准品⑦(1500 μg/mL) | 1 mL | 1 mL×5 |
| 即用型BSA标准品⑧(2000 μg/mL) | 1 mL | 1 mL×5 |
产品特点
good方便快捷——提供即用型标准品,省去繁琐的稀释步骤;
good准确性高——变异系数远小于考马斯亮蓝染色法;
good线性范围宽——灵敏,检测范围:20~2,000 μg/mL;
good兼容性好——与金属离子、还原剂、螯合剂及去污剂兼容性较好。
产品简介
goodBCA蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于BCA(Bicin-choninic Acid)法研制而成,实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与Cu2+络合生成络合物,同时将Cu2+还原成Cu+,BCA试剂可敏感特异地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,其在562 nm处有高的光吸收值,颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒含有一系列浓度的蛋白质标准品溶液(BSA溶液),即取即用,无需稀释,方便快捷。
使用说明
good◈以微孔酶标仪法为例:
gooddd1. 配置显色工作液:
gooddd1. a. 计算显色工作液总量:
goodgoodgoodd工作液总量 = (BSA标准品样本个数+待测样本个数)×复孔数×每个样本显色工作液体积
gooddd1. a. 举例:BSA标准品样本个数为8个,待测样本个数3个,复孔数3个。
goodgoodgoodd显色工作液总量 = (8个BSA标准品样本+3个待测样本)×3个复孔×200 μL(每个样本工作液体积) = 6.6 mL
gooddd1. b. 根据计算出的所需显色工作液用量,将试剂A和试剂B按照50:1的体积比,配制显色工作液,充分混匀。
gooddd1. b. 注意:1)由于加样可能存在误差,建议配制BCA工作液时,多配制1~2个孔的量;
gooddd1. b. 注意:2)新配制的BCA工作液室温密封条件下可稳定保存24 h。
gooddd2. 定量检测
| 孔号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
| 添加物 | 标准品① | 标准品② | 标准品③ | 标准品④ | 标准品⑤ | 标准品⑥ | 标准品⑦ | 标准品⑧ |
| 体积(μL) | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| BSA终浓度(μg/mL) | 0 | 125 | 250 | 500 | 750 | 1000 | 1500 | 2000 |
gooddd3. (2)用1×PBS或0.9%生理盐水将样品适当稀释(可以多作几个梯度,如2倍、4倍、8倍稀释),加20 μL到96孔板的样品孔中;
gooddd3. (3)各孔加入200 μL显色工作液,充分混匀,盖上96孔板盖,37℃孵育30 min,冷却至室温;
gooddd3. (3)注意:也可以室温放置2 h,或60℃放置30 min。BCA法测定蛋白浓度时,吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果蛋白浓度较低,可在较高温度孵育,或延长孵育时间。
gooddd3. (4)用酶标仪测定每个样品及BSA标准品的A562,或540~590 nm之间的其它波长的吸光度,注意要减去空白对照( 标准品① +工作液)的吸光度;
gooddd3. (5)绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。
gooddd3. (3)注意:数据处理时需要去除明显错误的值。待测样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。如果是计算机绘制的曲线,可从计算机给出的线性方程式计算出待测样品的浓度。
注意事项
干扰物质附表
| 化合物 | 耐受浓度 | 化合物 | 耐受浓度 |
| 缓冲液 | 去垢剂和变性剂 | ||
| 乙酸盐 | 0.2 M | Brij35 | 1% |
| 甘氨酸 | 1 M | CHAPS | 1% |
| HEPES | 0.1 M | 盐酸胍 | 4M |
| MES | 50 mM | NP-40 | 1% |
| MOPS | 50 mM | 辛葡糖 | 1% |
| 柠檬酸钠 | <1 mM | SDS | 1% |
| PIPES | 50 mM | Triton X-100 | 1% |
| 磷酸钠 | 0.1 M | 糖类 | |
| 乙酸钠 | 0.2 M pH 5.5 | 葡萄糖 | 10 mM |
| TES | 50 mM | 蔗糖 | 1 M |
| Tris | 0.1 M | 螯合剂 | |
| 盐类 | EDTA | 10 mM | |
| 硫酸铵 | 干扰 | 还原剂 | |
| NaCl | 1 M | β-巯基乙醇 | 50 μM |
| 尿素 | 3 M | DTT | 1 mM |
| 极性化合物 | 其它 | ||
| DMSO | 5% | HCl/NaOH | 0.1 M |
| 甘油 | 10% | 脂类 | 干扰 |
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