缩泉益肾方通过抑制YTHDF1-Rubicon轴促进自噬改善糖尿病肾脏疾病中的肾细胞衰老

缩泉益肾方（SQYSF）是一种治疗糖尿病肾脏疾病（DKD）的传统中药方剂，临床已证明其具有降低血糖和减轻肾损伤的功效。新出现的证据表明，细胞衰老是DKD进展的关键因素。本研究旨在利用体内（db/db小鼠）和体外（高糖诱导的HK-2细胞）DKD模型，并采用SQYSF水提物和含药血清进行干预，阐明SQYSF改善肾细胞衰老的机制。我们通过UHPLC-QTOF-MS筛选出59种化合物，并采用网络药理学方法发现自噬和细胞衰老是药物治疗疾病的重要通路。实验验证表明，db/db小鼠肾脏和高糖环境下的HK-2细胞发生衰老和损伤，而SQYSF可改善这些异常变化。此外，我们还发现SQYSF增强肾组织和细胞的自噬，而联合使用自噬抑制剂Bafilomycin A1可消除SQYSF的抗衰老作用。值得注意的是，DKD进展与Rubicon在mRNA和蛋白水平的表达升高以及m6A修饰增加相关。SQYSF有效下调Rubicon mRNA和蛋白表达，但不影响m6A修饰水平。进一步研究发现SQYSF能够靶向降低YTHDF1表达水平。在HK-2细胞中过表达YTHDF1可增加Rubicon mRNA稳定性和蛋白表达，同时逆转SQYSF诱导的自噬增强和衰老改善。这些结果表明，SQYSF通过靶向降低YTHDF1表达水平，抑制Rubicon mRNA和蛋白翻译水平，从而促进自噬，发挥改善DKD肾细胞衰老的作用。我们的研究揭示了SQYSF治疗DKD的活性成分和机制，这可能为SQYSF的临床应用及DKD的治疗途径提供有用的信息。