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- 2026年10月28日
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- 技术资料
- 服务名称：
免疫荧光染色实验服务
- 提供商：
晶莱生物
- 规格：
切片
一、制片
二、固定
固定的作用有三：
1. 防止标本从玻片上脱落。
2. 除去防碍抗原-抗体结合的类脂，使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果。
3. 固定的标本易于保存，如组织切片固定后在-20℃下可保存一年而不改变其染色特性。
1. 不能损伤细胞内的抗原。
2. 不能凝集蛋白质。
3. 不能损伤细胞形态。
4. 固定后应保持细胞膜的通透性，以允许抗体进入与抗原结合。
三、水洗
四、染色
①取固定标本，加已知的免疫血清，37℃孵育30 min。
②以PBS液3×3冲洗。
③再加荧光标记的抗抗体，37℃孵育30 min。
④PBS 3×3冲洗。
⑤H2O冲洗，凉干。
⑥加甘油缓冲液，封片、镜检。
（2）检查抗体：
①免疫后动物的淋巴组织涂片，自然干燥，甲醇固定。
②滴加相应抗原液（按1：100~1：500稀释），37℃孵育30 min。
③PBS液3×3冲洗。
④加荧光抗体，37℃孵育30 min。
⑤PBS液3×3冲洗。
⑥水洗，凉干。
⑦加甘油缓冲液，封片、镜检。
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