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免疫荧光染色实验服务

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  • 免疫荧光染色实验服务
  • 2026年01月14日
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      免疫荧光染色实验服务

    • 提供商

      晶莱生物

    • 规格

      切片

    免疫荧光又称免疫荧光抗体。免疫荧光实验原理是将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少,相对使用标记抗体用量偏大。利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。

    一、制片
    选无自发性荧光的石英玻片或普通优质玻片,洗净后浸泡于无水乙醇和乙.氧.基.乙.烷等量混合液中。用时取出用绸布擦净。将待检样品如组织块剪成适当大小印压于玻片上。也可采用冰冻切片或石蜡切片样品。

    二、固定
    除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外,一般均应固定。
    固定的作用有三:
    1. 防止标本从玻片上脱落。
    2. 除去防碍抗原-抗体结合的类脂,使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果。
    3. 固定的标本易于保存,如组织切片固定后在-20℃下可保存一年而不改变其染色特性。
    标本的固定原则是:
    1. 不能损伤细胞内的抗原。
    2. 不能凝集蛋白质。
    3. 不能损伤细胞形态。
    4. 固定后应保持细胞膜的通透性,以允许抗体进入与抗原结合。

    三、水洗
    固定后以冷的0.01 Mol/L pH7.4PBS液浸泡冲洗,最后以蒸馏水冲洗,防止自发性荧光。

    四、染色
    染色分直接染色法与间接染色法。
    1. 材料与试剂
    (1)荧光抗体,稀释至应用浓度。
    (2)0.01 Mol/L pH7.4PBS液
    (3)9份优质甘油加1份pH7.4PBS液即为甘油缓冲液。甘油有减少非特异性荧光的作用。
    (4)带盖方盘
    2. 直接染色法
    (1)将固定好的玻片置于湿盘中,滴加荧光抗体染色液,以覆盖为度,加盖,37℃感做30 min~45min。
    (2)PBS冲洗3次,每次冲洗3 min,即3×3冲洗。
    (3)蒸馏水冲洗。
    (4)滴甘油缓冲液一滴,封片,荧光显微镜检查。
    3. 间接染色法
    (1) 检查抗原:
    ①取固定标本,加已知的免疫血清,37℃孵育30 min。
    ②以PBS液3×3冲洗。
    ③再加荧光标记的抗抗体,37℃孵育30 min。
    ④PBS 3×3冲洗。
    ⑤H2O冲洗,凉干。
    ⑥加甘油缓冲液,封片、镜检。

    (2)检查抗体:
    ①免疫后动物的淋巴组织涂片,自然干燥,甲醇固定。
    ②滴加相应抗原液(按1:100~1:500稀释),37℃孵育30 min。
    ③PBS液3×3冲洗。
    ④加荧光抗体,37℃孵育30 min。
    ⑤PBS液3×3冲洗。
    ⑥水洗,凉干。
    ⑦加甘油缓冲液,封片、镜检。

    产品细节图片1

    晶莱生物病理类实验服务总览表

    类别 服务项目 备注 说明




    石蜡包埋 包埋1块 固定后组织按客户要求取材,脱水,包埋成蜡块(进口石蜡)
    特殊包埋(细胞、材料、眼球等) 包埋1块 包埋要求难度较高(含特殊位置取材)
    石蜡组织芯片 阵列点位包埋 客户提供供体蜡块及标本信息
    软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等) 1块标本软化 较为坚硬组织软化处理
    骨组织脱钙(小) 1块标本脱钙 最大面≤2cm²骨组织脱钙
    骨组织脱钙(大) 1块标本脱钙 最大面>2cm²骨组织脱钙
    骨组织EDTA脱钙(小) 1块标本脱钙 最大面≤2cm²骨组织EDTA脱钙
    骨组织EDTA脱钙(大) 1块标本脱钙 最大面>2cm²骨组织EDTA脱钙
    石蜡白片 石蜡白片1片 组织防脱载玻片石蜡白片
    冰冻组织制备 冰冻包埋及前处理 4%多.聚.甲.醛固定的组织或OCT包裹的新鲜组织(-80℃或液氮内保存,干冰运输)
    冰冻切片 冰冻组织切片1片 同一组织连续切片3张以上免制备费

    HE染色 染色含切片 苏木.精-伊红染色法,观察组织形态
    油红O染色 染色含冰冻切片 4%多.聚.甲.醛固定,冰冻切片。对组织内脂质(如脂滴)染色
    番红O固绿染色 染色含切片 常用于植物、软骨组织形态染色
    Masson染色 染色含切片 观察组织纤维化和肌纤维的鉴别及组织纤维化程度
    天狼猩红染色 染色含切片 观察组织纤维化程度,及偏振光进行胶原亚型的分区
    PAS糖原染色 染色含切片 观察肝脏、肌肉等组织内糖原的变化;肠胃肺支气管等杯状细胞酸性粘液物质变化
    阿利新蓝染色 染色含切片 常用于软骨组织或早幼粒细胞、巨核细胞染色
    甲苯.胺蓝染色 染色含切片 观察软骨组织形态或组织内肥大细胞的数量及分布
    尼氏染色 染色含切片 观察脑或脊髓等中枢神经系统内神经元尼氏体的变化
    LFB髓鞘染色 染色含切片 观察神经髓鞘的形态及变化
    普鲁士蓝染色 染色含切片 常用于吞噬细胞内铁粒子的含量和定位
    VG染色 染色含切片 显示组织胶原纤维及肌纤维的形态及变化
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    组化
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    免疫荧光(冰冻-单标) 染色含冰冻切片和拍照 需实验前商定拍照倍数及视野
    免疫荧光(冰冻-双标) 染色含冰冻切片和拍照 需实验前商定拍照倍数及视野
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    Tunel Tunel(POD自带试剂盒) 染色含切片 细胞凋亡染色,客户需提供Tunel试剂盒
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    凋亡试剂盒代购 染色含切片 详情请咨询工作人员


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