HE染色

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实验周期：普通样本，1周内；骨头类坚硬样本，2-3周

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产品简介
苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法 ，石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ；伊红为酸性染料 ，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

• 简介及原理

苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining )，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一 ，其是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ；伊红为酸性染料 ，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。

• 染色流程

实验样本说明
组织样本
石蜡切片
取材要求：：组织固定越新鲜越好，组织离体后，需及时固定。原则上动物死亡后15分钟内完成取材并及时固定组织。
：组织标本不宜过大。由于所有的固定液都具有穿透力不强、侵透度不大等特点，凡是需要固定的组织，都不应太大太厚。
固定要求：：固定液的选择：10%福尔马林（4%多聚甲醛）或10%中性甲醛是病理切片常规使用的固定液，可以兼顾常规染色和免疫组织化学。
：固定液的用量：一般加入固定液的量与组织体积比为10：1～20：1。
：组织固定：固定时间不宜太短，也不宜太长。固定时间太短，会影响组织固定的效果；时间太长，福尔马林会形成聚甲醛，影响核的染色。固定时间主要根据材料块的大小及松密程度以及固定液的穿透速度而定，可以从1小时至数天，通常为数小时至24小时。
切片保存：做好的切片，经60℃烤片3-5小时后，可存放于4℃保存；若存放时间较长，最好存于-20℃。
冰冻切片
取材要求：对于将要做冰冻切片的组织,取材后需立即置于超低温冰箱或液氮中保存.
固定要求：样本冰冻切片后，应立即将切片放入甲醇、95%酒精、丙酮、4%多聚甲醛等固定液中固定
切片保存：固定好的切片，自然风干，密封好可置于-80℃、-20℃保存，但最好尽快用于后续实验。
细胞样本
细胞块石蜡切片：对于一些细胞量较多的样品，可离心分离所需细胞，用中性甲醛固定后，制作成琼脂细胞块。然后按照制作石蜡切片的操作流程进行切片。
细胞爬片：在孔板里做的细胞爬片，爬片取出后，用PBS洗涤2次，用4%多聚甲醛4℃固定15分钟，将表面液体吹干，置于-20℃保存。若短时间内开展实验，可在加固定液后，于4℃冰箱中放置一段时间。
细胞涂片：细胞学涂片常用的固定液有95%酒精、酒精-冰醋酸液、(C₂H₅)₂O-酒精液和Carney’s液等，其中95%酒精较为常用。

• 染色结果

1、细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色；
2、软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色；
3、粘液呈灰蓝色；
4、细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色；
5、胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色；
6、胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色；
7、红血球呈橘红色，蛋白质类液体呈粉红色。

细胞或组织的着色情况与其种类有关，同时也随其生活周期及病理变化而发生改变。（例如：很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。 胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。）


四．HE部分实例

肾HE(200倍)
肾小管无扩张，排列整齐，结构完整，无球后出血，无中性粒细胞浸润。



小肠HE(200倍)
小肠绒毛缺损，有溃疡形成，肿胀明显，血管周围出血明显，基底层断裂。


正常肝HE
肝小叶横切面中肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列

肝硬化HE
肝脏组织中出现明显的纤维化病变。

胃底腺HE（400倍）
腺体上半部多分布壁细胞，壁细胞胞体较大，多呈圆锥体形，核圆居中，有的可见双核，胞质强嗜酸性，染成红色。


公司简介
深圳中洪博元生物技术有限公司是国内领先的生物医学领域整套科研服务供应商，是提供医学实验技术服务、整体实验外包一站式服务的生物医学类高科技企业

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