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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
张
一、服务简介
二、标准化全套实验流程
- 样本规范取材、专用免疫电镜固定液低温固定;
- 低温脱水、梯度树脂渗透、低温紫外聚合包埋;
- 70–80nm 超薄切片并捞取至镀膜镍网;
- 完整单标免疫孵育、胶体金标记、铀重金属复染、烘干;
- 透射电镜上机成像采集图片。
三、样本取材、储运规范
- 离体 1–3 分钟内完成取样,组织尺寸严格控制为 1mm³;提前准备装有免疫电镜固定液的培养皿,离体组织即刻投入固定液内切割分块,再转移至装有新鲜固定液的容器;
- 精准截取目标观测区域;皮肤、肠道等易卷曲组织可粘贴滤纸后再固定;
- 全程使用锋利刀片,禁止镊子挤压、拉扯造成组织机械挫伤;
- 组织固定后 4℃冰袋运输,储运全程固定液不可冷冻结冰;样本固定完成后尽快开展实验,减少抗原流失、降低标记效果损失。
四、抗体相关说明
五、交付全套成果
- 完成胶体金单标标记、铀复染的镍网切片;
- 带黑色胶体金颗粒信号的透射电镜原图,直观呈现目标蛋白亚细胞分布;
- 如需电镜图标注、定量测量,可搭配图像分析类配套服务。
六、适用科研场景
电镜病理分析
透射电镜病理分析全套(包埋+制片+拍照+典型视野病理分析)
电镜看拍
免疫电镜包埋
超薄切片(镍网)
免疫电镜单标标记
免疫电镜双标标记
免疫电镜单标全套
免疫电镜双标全套
抗体费(免疫电镜)
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文献和实验免疫电镜技术的染色方法 免疫 电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参考本书第四章,这里仅介绍免疫电镜的几种染色方法,包括包埋前染色、包埋后染色和冰冻超薄切片免疫染色三种。 1.包埋前染色 包埋前染色即在进行常规电镜包埋处理前先行免疫组织化学染色,然后于解剖显微镜下将免疫反应阳性部位取出,修成2~4mm3大小的组织块,再按常规电镜方法处理,包括戊二醛的再固定、锇酸后固定、脱水、包埋、超薄切片和电镜观察等。如果特三性免疫
免疫电镜(immunoelectron microscopy)
将抗体进行特殊标记后用电子显微镜观察免疫反应的结果。根据标记方法的不同, 分为免疫铁蛋白技术、免疫酶标技术和免疫胶体金技术。如免疫铁蛋白技术是将含铁蛋白通过一种低分子量的双功能试剂与抗体结合,成为一种双分子复合物,它既保留抗体的免疫活性,又具有电镜下可见的高电子密度铁离子核心,因此用铁蛋白标记的抗体可通过电镜免疫化学的方法在电镜下定位细胞中的抗原。由于某些固定技术(如锇酸固定)对抗体抗原的结合有干扰,因此应采取较为温和的样品制备方法。
1.标记物 用于电镜观察的标记物有三类:一类是电子密度致密的标记物,如铁蛋白、辣根过氧化物酶等。另一类则是放射性同位素,如135 I、35 S、32 P、14 C、3 H等,第三类则是有独特形状的标记物,如血兰蛋白、噬菌体等。 对标记物的要求是:具有特定的形状、不影响抗原抗体复合物的特性与形状。目前用于免疫电镜的标记物主要是铁蛋白和HRP。两者各有其优点,铁蛋白电子密度致密。观察时反差大,优于酶标记,但铁蛋白分子量大(460 000),穿透能力差,所以适于细胞
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