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- 2025年12月31日
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RNA荧光原位杂交(RNA-FISH)
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广州伯信生物科技有限公司
RNA-FISH原理：如果待检测的细胞或组织切片上的靶核酸与所用的核酸探针是同源互补的，二者经变性-退火-复性，即可形成靶核酸与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素或直接标记荧光素，可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应或直接经荧光检测体系在镜下对待测核酸(mRNA、lncRNA、circRNA、miRNA)进行定性、半定量或相对定位分析的一种实验方法。
① 组织：新鲜或固定（10%中性甲醛、4%多聚甲醛）组织样本；
② 细胞：新鲜（大于106）或固定（10%中性甲醛、4%多聚甲醛）细胞样本；
③ 切片：石蜡切片，冰冻切片以及细胞爬片，涂片；
④ 实验信息：基因名称及ID；
伯信提供
① 染色后的切片；
② 探针序列；
③ 电子图片（普通荧光显微镜/激光共聚焦显微镜）；
④ 实验报告（实验仪器、试剂、方法、结果、结论）;
结果实例
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文献和实验相关专题 miRNA RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”，但越来越多的证据清楚的表明，RNA在生命的进程中扮演的角色远比RNA我们早前设想的更为重要。 RNA干扰（RNA interference）的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识，更因为可以简化替代基因敲除而成为研究基因功能的有力工具，因此格外引人注意，在2002年度Science评选的10大科学成就中RNAi名列榜首。 随着对小分子RNA研究的不断深入，研究人员开始认识到：小分子RNA的世界一点都不小
在基础科研领域，mRNA、IncRNA、circRNA、miRNA是科研界的宠儿，吸引着无数科研狗们前仆后继。打开pubmed搜索RNA的文章，许多篇都有RNA荧光原位杂交（RNA-FISH）的身影，然而受限于实验仪器，技术或者经费的影响，对于一些硕博生们，RNA-FISH始终如那海市蜃楼，可望而不及。没关系，今天科研狗小助手带你手把手做RNA-FISH。 一、原理 荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，FISH)是一种利用荧光标记的核酸
实验目的：掌握由动物组织中提取总RNA的方法 实验原理：Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液，其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性，随后加入氯仿，酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同，造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中，RNA则分布在上层的水相中，最后用异丙醇沉淀水相中的RNA，并用70%乙醇洗涤沉淀，这样就可以得到比较纯净的总RNA. 实验步骤： ① 先在研钵中加入液氮，再将组织剪成小块在液氮中磨成粉末，用液氮预冷的药匙取50～
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