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上海代轩生物科技有限公司
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免疫组化
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张/指标
免疫组化
免疫组化,是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
一、实验流程
1.组织脱水
2.石蜡包埋
3.石蜡切片
4.石蜡切片脱蜡
5.抗原修复
6.阻断内源性过氧化物酶
7.BSA或者血清封闭
8.加一抗
9.加二抗
10.DAB显色
11.复染细胞核。
12.脱水封片
13.显微镜镜检,图像采集分析
二、服务说明
客户提供:固定好的样本、石蜡块均可,一抗;
结果提供:免疫组化实验报告、免疫组化结果图片、实验结果的分析和统计(阳性率分析);
外地客户可寄送,上海本地客户可上门收样。
实验周期:1-2周(具体请咨询)
注意:
1.新鲜组织固定于4%PFA 24h以上
2.取材切面要平整,厚度不宜超过2mm
3.请明确拍照部位及倍数(一般为40X,100X,200X,400X)
| 服务项目 | 收费标准 | 标本要求 | 备注 |
| 石蜡包埋 | 15元/样本 | 固定后的组织 | 本价格包含样本包埋,不含切片及后续实验 |
| 石蜡切片 | 5元/样本 | 蜡块 | 无 |
| 冰冻切片 | 15元/样本 | 速冻后新鲜组织 | 无 |
| 免疫组化(IHC-P) | 30元/样本/指标 | 切片 | 客户提供一抗 |
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文献和实验一、石蜡切片和冰冻切片的比较? 1、要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。 2、冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写
不完全,若存在,需延长脱蜡时间或换用新的二甲苯。 (5)抗原修复不完全:对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合。 (6)细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应:可加入组织透化步骤,进行细胞膜或核膜的透化。 (7)试剂盒保存不当:请于 4℃ 进行保存,勿室温防止过长时间。 (8)封闭时间过长:若使用封闭液进行封闭,请排除封闭液对抗原抗体结合的影响。 Q2:免疫组化染色弱怎么办? (1)抗体浓度过低,孵育时间过短:可提高抗体浓度,进行抗体4℃过夜孵育。 (2)组织
管树军621 各位大侠,我在论坛上看到大家检测NF/KB与IKBa用的都是WB的方法,我想用免疫组化的方法,好出结果吗,两者相比那种方法更容易出结果呢?我只想只一个好出结果的方法并且试剂相对便宜一些。谢谢!请高手指点。我的邮箱是guanshujun621@163.com 00501101 如果你是硕士的话,可以骗过国内的人,蒙混过毕业就行了 如果你是博士的话,要发SCI,请不要用组化代替wb,老外没有人这样代替
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