丁香通
丁香园
论坛
医药招聘
丁香医生
更多
调查派
用药助手
丁香搜索
医药数据库
来问医生
我要登录
|
免费注册
|
我的丁香通
企业机构:
成为企业机构
个人用户:
个人中心
移动端
搜实验
大家都在搜
大家都在搜
0 人通过求购买到了急需的产品
免费发布求购
搜索
发布求购
实验专区
实验库(10000+)
实验问答
实验专题
热门视频
前沿资讯
科研者之家
丁香通
>
实验专区
>
实验问答
>
全部
实验问答
25,305,416 科研人在看
科研学霸天团,48小时有问必答
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
RNA的提取原理是什么?
小布丁瑶瑶
RnA提取原理:Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。
4 回答
1878 围观
4 回答
1878 围观
去回答
问
细胞培养需要注意什么?
迟C迟
首先注意观察细胞培养液的颜色。 现在的细胞培养液通常都放有酸碱指示剂(绝大部分是酚红)。 细胞在培养生长过程中,不断在培养液上清中累积酸性物质,时间长了,培养液变为黄色(同时培养液中营养物质耗尽)。 其次镜下观察细胞的生长状态是否良好,是否需要传代。 如果生长状态不好,需要对培养液进行调整(一般是加大 血清 浓度)。 过于密集出现大片融合或太密集而导致细胞脱落,则进行传代。 如果长势良好,且细胞培
5 回答
560 围观
5 回答
560 围观
去回答
问
免疫荧光染色实验中染料的选择。
做药鹏
尽量选择光谱重叠比较少的荧光基团进行组合,进行两个不同蛋白的共染色。标记好荧光的细胞片应今早观察,或者用封片剂封片后在4℃或者-20℃避光保存,以免因标记蛋白解离或荧光减弱,还可以利用免疫荧光专用细胞处理试剂进行预处理减少自发荧光或荧光信号的淬灭。
5 回答
3173 围观
5 回答
3173 围观
去回答
问
RNA干扰技术可以用在哪些领域?
小布丁瑶瑶
RNA干扰技术可以用于包括鉴定基因功能、疾病治疗、植物病毒抗性研究在内的多项研究领域。
4 回答
656 围观
4 回答
656 围观
去回答
问
通过对引物进行预处理,但仍然存在异常(还是有杂质),应该怎么办?
迟C迟
首先搞清楚是什么杂质?如果是不溶的杂质,可以通过离心沉淀等方法,上清的引物还能用。如果是溶解性杂质,建议重新订引物吧。
3 回答
673 围观
3 回答
673 围观
去回答
问
Wb实验中二抗的作用?
府宅
二抗用于检测细胞或组织样本中的蛋白表达。它与抗原特异性一抗结合,二抗可检测目标蛋白中的高度特异性氨基酸序列。二抗对一抗的指定区域或区域的特异性允许多个二抗与单一一抗结合,放大信号并增加检测敏感性。二抗保存的好可用2-3次。
3 回答
12332 围观
3 回答
12332 围观
去回答
问
EDTA不小心弄到皮肤上,眼睛里,嘴里应该怎么办?
Kimser
EDTA用于福尔马林固定、石蜡包埋组织切片免疫组织化学染色前的抗原修复。虽然其ph是9,不过一般使用时都是稀释过的,所以危害不大,一旦进入眼睛或皮肤,先用大量流动自来水冲洗一段时间后再就医检查。注意防护,戴好手套和护目镜等,也可以换用柠檬酸缓冲液。
3 回答
1508 围观
3 回答
1508 围观
去回答
问
用DEPC溶解的时候促溶温度在什么范围与样品类型有关吗?
dxy_gwrp7ndq
与样品类型无关,一般在室温下溶解就可以了
3 回答
497 围观
3 回答
497 围观
去回答
问
超声粉碎细胞时需不需要冰上操作,怎么样才能不让温度升得太高?
whilt-shirt
正常来说是需要的,但是不太好操作,一般都是超声5-10s放冰上,然后再超声
3 回答
1213 围观
3 回答
1213 围观
去回答
问
跑磷酸化蛋白是不是不能用奶粉封闭啊?什么替代最好?
YLO6WJ
可以用脱脂奶粉封闭,5%BSA也可以
3 回答
830 围观
3 回答
830 围观
去回答
问
提出来的蛋白样品最多能保存多长时间呢?在什么条件下保存最好?
毛桃子啊
确定每个样品的浓度之后,可将其冻存于 -20 ℃ 或 -80 ℃(一年) 以备后续使用。建议分装保存,避免反复冻融。
3 回答
12015 围观
3 回答
12015 围观
去回答
问
跑磷酸化蛋白有什么要特别注意的吗?出来的条带不明显,几乎看不到。
staywalking
1.收集细胞在冰上,加入磷酸酶抑制剂。足量裂解液。2.超声样本,促进蛋白溶解。3.增加上样量到40ug.4.根据推荐的方法稀释抗体。5.洗膜 TBST 5分钟三次。6.确定总蛋白是否有表达。然后排查该位点磷酸化是否被诱导,是否在合适的检测窗内(多设时间段)。用成熟的诱导Model制备阳性对照,可能你的模型或者样本里这个位点就是没有被磷酸化。
3 回答
422 围观
3 回答
422 围观
去回答
问
RNA提取OD多少合适做逆转录?
whilt-shirt
一般选择在1.6-2.0之间,越接近2.0越好,浓度在500ng/ul左右
3 回答
741 围观
3 回答
741 围观
去回答
问
RNA片断如何修复?
迟C迟
噬菌体的 RNA 修复系统是人们发现的第一个 RNA 修复系统,用来修复宿主细胞抗病毒反应等导致的 RNA 损伤,其修复途径由 T4 多核苷酸激酶磷酸酶(Pnkp)和 RNA 连接酶 1(Rnl1)共同催化。
3 回答
790 围观
3 回答
790 围观
去回答
问
免疫组化标本保存用生理盐水还是甲醛?
迟C迟
甲醛和生理盐水都可以。如必须保存时,则应保持置4℃以下保存。 一般细菌涂片或器官组织切片经固定后可保存1个月以上。
3 回答
1366 围观
3 回答
1366 围观
去回答
问
对于靶基因的干扰实验,shRNA和siRNA该如何选择?
迟C迟
siRNA和shRNA之间进行选择时,要考虑的一个重要因素是实验时间的长短。 siRNA在细胞中瞬时表达的,通常在3-5天内进行检测,而shRNA可以通过病毒或质粒介导的转染保持稳定。
3 回答
1730 围观
3 回答
1730 围观
去回答
问
大分子量蛋白(470kDa)如何快速转膜?
staywalking
Tris- Acetate gel电泳,低浓度甲醇冰水浴湿转。欲速则不达。
6 回答
3112 围观
6 回答
3112 围观
去回答
问
蛋白质纯度分析的方法有哪些?
毛桃子啊
蛋白质纯度鉴定的方法包括有电泳法、基于层析技术的方法、免疫化学法、蛋白质化学结构分析法和超速离心法等。其中最常用的是电泳法和高效液相层析(即高效液相色谱,HPLC)。质谱法可以与上述方法相结合,实现目的蛋白质和其他蛋白质的精确鉴定。
3 回答
2503 围观
3 回答
2503 围观
去回答
问
使用Invitrogen iBlot2应该怎么快速转膜?具体步骤
丁香粉猪猪
参考 转膜:如何使用 Invitrogen iBlot 2转印系统7分钟快速干转】https://m.baidu.com/video/page?pd=video_page&nid=10074237698057605529&sign=6838240746659596356&word=%E4%BD%BF%E7%94%A8Invitrogen+iBlot2%E5%BA%94%E8
2 回答
546 围观
2 回答
546 围观
去回答
问
蛋白质定量测定,误差在什么范围内可以忽略不计?
丁香粉猪猪
蛋白含量测定,有好几种方法,你说的是什么方法不同的方法使用的仪器,要求条件,等等不一样,你让我怎么回答?比如:吸光光度法:UV280nm 测蛋白质溶液的吸收值,与标准蛋白对照,得出浓度。BCA法:Cu2+与蛋白质形成络合物,普通光线读取溶液表面“灰度”,得出浓度。
2 回答
617 围观
2 回答
617 围观
去回答
1
•••
799
800
801
802
803
•••
1007
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序