府宅
排除蛋白问题,抗体问题,再出现大白板很有可能就是转膜的问题了,试试改变一下转膜条件,转膜完成以后用丽春红染个膜大概看看转膜效果
淡淡的花香xsl
我以前也出现过类似的问题,有时候是二抗原因,重新敷二抗就有了。有时候是蛋白样品的问题。有时候会碰到一批的样品,怎么做都没有条带。或者说自己配制的试剂有没有问题。
bqejjh123
转膜一般还是用衡流好一些,所以最好不要用衡压,而用衡流。我用的是380毫安,半小时,我的蛋白分子量是46KD。有人用200毫安,2小时效果也挺好的。转膜结束后胶上的染色变浅,说明有些已经转过去了,但是转膜的时间和强度不够。建议换成衡流试一下,应该可以的。
dxywode
说明没有转上去啊 膜先用甲醇激活了吗 一般胶上有点很正常的 不可能都转上膜 但MARKER一般都能转到的 我觉得你是转膜这部出现问题了 膜的孔径对吗 我有一次也出现这样的问题