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        单个目的蛋白抗体显影后出现两个条带一般是什么问题?

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        卜蜂莲儿

        单个目的蛋白抗体显影后出现两个条带一般是什么问题?

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        3 个回答

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        1.非特异性的分子量偏大条带之一可能是目的蛋白在SDS PAGE出的问题出了问题,另外两个带可能本来就是杂带了。可以回收后对条带用质谱检测精确的分子量加以确定。
        2.非特异性的分子量偏大条带至少应该有杂带,杂带出现而且与一抗相互作用,那么只能说杂带的顺序表位也能被一抗识别,必须更换专一性更高的抗体。
        3.还有考虑你的镍柱亲和分离的问题,是不是获得了你的需要的目的蛋白质。

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        有可能是抗体敷育时间过长和特异性不好导致的

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        小布丁瑶瑶

        有帮助
        • 一般这种情况主要从免疫反应上找原因,有可能是样品的翻译后修饰,如糖基化,这是比较常见的现象,可查阅比较权威的文献, 有时文献上会有相关报道;也有可能是抗体的原因,不过比较少
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