丁香通
丁香园
论坛
医药招聘
丁香医生
更多
调查派
用药助手
丁香搜索
医药数据库
来问医生
我要登录
|
免费注册
|
我的丁香通
企业机构:
成为企业机构
个人用户:
个人中心
移动端
搜实验
大家都在搜
大家都在搜
0 人通过求购买到了急需的产品
免费发布求购
搜索
发布求购
实验专区
实验库(10000+)
实验问答
实验专题
热门视频
前沿资讯
科研者之家
丁香通
>
实验专区
>
实验问答
>
全部
实验问答
28,540,995 科研人在看
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
请问提取蛋白原液第一天测BCA后忘记放负80冰箱,4度冰箱过夜,担心蛋白降解,第二天重新测BCA,为什么有的样本蛋白浓度反而升高
whilt-shirt
BCA法本来就存在误差,你这个只能说是误差,并不能说是升高了
3 回答
3443 围观
3 回答
3443 围观
去回答
问
请问老师跑成这样什么原因呀?
whilt-shirt
胶有问题或者电泳液过期了,建议重新配胶电泳
3 回答
307 围观
3 回答
307 围观
去回答
问
CTAB法提取植物基因组DNA总失败,怎么做才能成功?
Eason老歌迷
我觉得你可以注意以下几点。你磨样的时候一定要使材料处于低温状态。不然啊DNA降解得很厉害。加入异丙醇后,出现的DNA絮状物给他挑出来,不要离心,不然不完整的DNA会增多。
4 回答
1774 围观
4 回答
1774 围观
去回答
问
在含DNA的滤液中加入嫩肉粉与将含DNA的滤液中放在60~75℃的恒温水浴箱中保温10~15min的原理有什么不同?
bamboopiggy
一个是化学性的,利用嫩肉粉中的木瓜蛋白酶,酶解去除蛋白质。一个是物理性的,利用DNA和蛋白质变性的温度差,将蛋白质变性,而不影响DNA。两者都是为了去除蛋白质。
4 回答
398 围观
4 回答
398 围观
去回答
问
对提取出的人的全基因组DNA进行琼脂糖凝胶电泳,胶孔总会很亮,仿佛有DNA的残留,未完全跑下来,为什么?
天一湖医者
主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物
4 回答
878 围观
4 回答
878 围观
去回答
问
蛋白原液做完BCA放在4度过夜了,第二又测了一次BCA,结果如图,这批蛋白还能用么?
balalaLy
肯定是有降解的。BCA测浓度只是相对定量。跟BCA试剂的作用时间和作用温度很大关系。只能同一时间点测的样品间做比较,前后两次的只能看个大概。跑wb的话应该也是可以跑出来的,你就跑跑看呗。结果符合预期就当做一次重复实验呗。
3 回答
5770 围观
3 回答
5770 围观
去回答
问
用KOD高保真酶做PCR扩增200+bp产物,模板含量低,延伸时间分别设1,5,10s,相对Taq酶出现很多非特异扩增,怎么办?
Eason老歌迷
可以适当的加入dmso,来增加特异性。也可以适当提高退火的温度
4 回答
462 围观
4 回答
462 围观
去回答
问
免疫共沉淀标签的作用?
bamboopiggy
有标签,用标签抗体,比特异性抗体便宜且好用
3 回答
872 围观
3 回答
872 围观
去回答
问
定量PCR中两步法跟三步法有啥区别?对结果影响大吗?
bamboopiggy
对定量pcr来说:因为产物是短片段,用两步法或三步法影响不大。两步法即循环扩增中设置2个步骤,一个是95度变性,另一个是退火与扩增的温度,一般设置在55~60之间,主要用于扩增短片断,节省时间。三步法就是平常见到的方法,扩增分三步,变性,退火,延伸。时间稍长。
3 回答
14717 围观
3 回答
14717 围观
去回答
问
细胞IF 4片2组,1个对照组跟实验组对比结果是想要的 另1个对照组荧光强度跟实验组对比没太明显。需继续做还是说抗体没有明显表达
bamboopiggy
先确定你的抗体是好使的,找个阳参,否则不能说明你的蛋白没有明显表达
2 回答
226 围观
2 回答
226 围观
去回答
问
DNA琼脂糖凝胶电泳
dxywode
电泳时间可能过长,一般75v×30min左右,但是具体看溴酚蓝得离孔距离和目的条带离孔距离。利用电泳可以确定胶体微粒的电性质,向阳极移动的胶粒带负电荷,向阴极移动的胶粒带正电荷。金属氢氧化物、金属氧化物等胶体微粒吸附阳离子,带正电荷;非金属氧化物、非金属硫化物等胶体微粒吸附阴离子,带负电荷。
5 回答
819 围观
5 回答
819 围观
去回答
问
逆转录PCR实验中,逆转录后,一般取多少的cDNA进行后继的PCR圹增?
迟C迟
我们实验室是逆转录之前控制逆转录的量,然后PCR体系中模板量用4微升,一般不超过体系的10%。
4 回答
968 围观
4 回答
968 围观
去回答
问
DNA转录技术需要注意的易错细节有哪些?
Eason老歌迷
所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。用大口滴管或吸头操作,以尽量减少打断 DNA 的可能性。提取 DNA 过程中所用到的试剂和器材要通过高压烤干等办法进行无核酸酶化处理。 要用新鲜样品或液氮冷冻-70 度保存的样品。这样通过降低内切酶的活性 DNA 的降解。
4 回答
835 围观
4 回答
835 围观
去回答
问
ip实验IgG组也有条带什么原因
dxywode
你的样品是否煮样? IgG的轻链大小25KD,重链大小为50KD,所以很有可能是重链。建议IP抗体和WB抗体使用不同种属来源的一抗。
4 回答
917 围观
4 回答
917 围观
去回答
问
巨噬细胞造泡沫细胞模型?
天一湖医者
是不是细胞已经处于发炎状态了?
2 回答
637 围观
2 回答
637 围观
去回答
问
请问大鼠实验,做心肌缺血再灌注的,要打ly294002,用什么剂量,打多久,怎么配液?
bamboopiggy
5% DMSO+ 40%PEG300+5% Tween80+50%ddH2O 现用现配(3mg/mL),但是你可以把ly294002 溶解在DMSO可以达到61mg/ml 的浓度,然后取3mg 大概就是50ul,然后再加PEG300 400ul,50ul的tween80,和500ul的ddH2O,就可以了。注射量可以在50-100mg/kg之间吧。
3 回答
778 围观
3 回答
778 围观
去回答
问
PCR结果CT值多少比较适合
迟C迟
Actin的CT值一般会小一点,20左右。目的基因看表达,一般低于37/38都还能用,太低可以稀释样本。
4 回答
9804 围观
4 回答
9804 围观
去回答
问
磁珠法提取动物组织DNA,晾干时加热效果大吗?
Eason老歌迷
磁珠粒径小,磁含量少;磁性弱,亲水性不够;解决方案:筛选、替换匹配的磁珠。磁性分离器磁场弱,吸磁效果不理想;解决方案:选择高磁性分离设备,或增加磁吸时间。由于裂解不完全,导致样本黏度过大;样品裂解后,释放蛋白、其他杂质将磁珠紧紧包裹,影响磁吸效果。
3 回答
952 围观
3 回答
952 围观
去回答
问
这个图是怎么看出结果的,我知道结果,我不知道怎么看出来的通过染色颜色的深浅嘛?求求各位大佬指路
dxywode
请问是什么图呢?上传了我分析一下。
3 回答
316 围观
3 回答
316 围观
去回答
问
怎样判断小鼠腹腔注射是否打入了腹腔而不是肠内?
bamboopiggy
一般针头进入腹腔,不会扎到肠的,肠外面有浆膜层,会滑开,但是扎入腹腔后,要回抽一下,防止扎入血管
4 回答
3708 围观
4 回答
3708 围观
去回答
1
•••
733
734
735
736
737
•••
1009
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
领取干货资料
反馈
TOP
打开小程序