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        CTAB法提取植物基因组DNA总失败,怎么做才能成功?

        相关实验:痘苗 DNA 检测实验

        user-title

        dxywode

        CTAB法提取植物基因组DNA总失败,怎么做才能成功?

        wx-share
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        4 个回答

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        我觉得你可以注意以下几点。

        你磨样的时候一定要使材料处于低温状态。不然啊DNA降解得很厉害。

        加入异丙醇后,出现的DNA絮状物给他挑出来,不要离心,不然不完整的DNA会增多。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        你的植物新不新鲜?是不是多糖含量太高了?液氮的研磨要充分,酚氯仿抽提的时间可以延长。

        user-title

        未来9

        有帮助

        要用冰冻材料提出高质量的基因组DNA,应确保以下几点:

        1.确保采样后立即投入液氮中保存.

        2.在磨样时一定要一直使材料处于低温状态。研磨前先将液氮倒入研钵,研钵彻底冷却后,再放入材料,研磨过程中,一定不要让液氮挥发净使材料回温!否则会DNA降解得很厉害。装管的时候,材料一定要有液氮的保护才行!否则研磨时的液氮保护DNA不都前功尽弃了?
        可以这样做:将几个离心管放入一个容器,向容器中加液氮,将其冷冻一下,使之处于低温状态,将液氮还为挥发干净的材料放入管内,不要急着盖盖子,因为液氮不挥发干净就盖上会再次弹开。将离心管放入盛有液氮的容器,等管内的液氮挥发干净盖上盖子即可。
        另外,如果是在离心管上编号,最好在冷冻前写好,否则离心管冷冻后材料会受影响不说,也很难写上。
        提取DNA时加液氮的目的主要是防止DNA的降解,所以必须一直提醒自己,减少材料回温的机会,液氮保护必须自始至终。

        3.在用CTAB法提取时,刚投入水浴时可以稍快速的晃动,之后的晃动一定要轻柔!

        4.加酚/氯仿/异戊醇静置30min后,离心温度不可过低。尽量保持在15度以上。

        5.将DNA加入异丙醇析出时用的枪头一定要剪过的。这点很重要。过尖的枪头会把DNA链弄断。

        6.加入异丙醇后出现的DNA絮状物尽量要挑出,尽量不要离心,因为离心后虽然产量会增大,但是不完整的DNA也增多了。

        user-title

        yfcwyh

        有帮助

        要用冰冻材料提出高质量的基因组DNA,应确保以下几点:1.确保采样后立即投入液氮中保存.2.在磨样时一定要一直使材料处于低温状态。研磨前先将液氮倒入研钵,研钵彻底冷却后,再放入材料,研磨过程中,一定不要让液氮挥发净使材料回温!否则会DNA降解得很厉害。装管的时候,材料一定要有液氮的保护才行!否则将几个离心管放入一个容器,向容器中加液氮,将其冷冻一下,使之处于低温状态,将液氮还为挥发干净的材料放入管内,不要急着盖盖子,因为液氮不挥发干净就盖上会再次弹开。将离心管放入盛有液氮的容器,等管内的液氮挥发干净盖上盖子即可。另外,如果是在离心管上编号,最好在冷冻前写好,否则离心管冷冻后材料会受影响不说,也很难写上。提取DNA时加液氮的目的主要是防止DNA的降解,所以必须一直提醒自己,减少材料回温的机会,液氮保护必须自始至终。3.在用CTAB法提取时,刚投入水浴时可以稍快速的晃动,之后的晃动一定要轻柔!4.加酚/氯仿/异戊醇静置30min后,离心温度不可过低。尽量保持在15度以上。5.将DNA加入异丙醇析出时用的枪头一定要剪过的。这点很重要。过尖的枪头会把DNA链弄断。6.加入异丙醇后出现的DNA絮状物尽量要挑出,尽量不要离心,因为离心后虽然产量会增大,但是不完整的DNA也增多了。

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