磁珠法提取动物组织DNA，晾干时加热效果大吗？
dxy_zgtod6u0
我们实验采用磁珠法提取动物组织样本。先对动物组织样本进行裂解，后续用磁珠法试剂盒提纯（自动化设备，移液法）。在晾干时，由于自动化设备采用的是移液法，所以磁珠晾干不彻底，目测有液体残留。后续建库效果不理想，不知道是不是因为乙醇残留。所以我们在晾干时，让设备同步增加了加热（60℃）加速乙醇挥发。但是目测磁珠结块，洗脱得率不如之前的结果。请问大家一般是怎么平衡这个问题的？或是对晾干步骤有比较好的建议吗？
3 个回答
Eason老歌迷
磁珠粒径小，磁含量少；磁性弱，亲水性不够；解决方案：筛选、替换匹配的磁珠。
磁性分离器磁场弱，吸磁效果不理想；解决方案：选择高磁性分离设备，或增加磁吸时间。
由于裂解不完全，导致样本黏度过大；样品裂解后，释放蛋白、其他杂质将磁珠紧紧包裹，影响磁吸效果。
bamboopiggy
您可以适当延长晾干的时间，来增加乙醇的挥发，不建议加热到60，可能会对磁珠表面挂的东西造成损伤，从而降低得率
未来9
理论上是有效果的。DNA在加热时会被二苯胺染成蓝色。起到便于提取的作用。
原理：
1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。
2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。
3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。
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