实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问亲和标记法和膜重建法鉴定膜上蛋白质是否为膜转运蛋白的方法？

whilt-shirt

可以选用荧光标记或者His探针试试

3 回答536 围观

问活体成像c57灌胃带荧光菌液必须脱毛么？

balalaLy

一般都会剃毛比较好，毛发会带有背景荧光造成干扰。

3 回答751 围观

问求助：od为2的引物稀释方法？

未来9

1nmol用10ul ddh2o稀释，浓度为100um,此浓度为储藏浓度，工作浓度要稀释到10um.订引物时候，填10nmol就可以了，不用管 od

3 回答1617 围观

问为提取结核杆菌的RNA，如何破壁？

未来9

可以采用超声波联合Trizol法、玻璃珠(简称"玻珠")联合Trizol法(简称"玻珠法")和Trizol法(简称"不加玻珠法"),对结核分枝杆菌进行破壁,提取总RNA

3 回答1037 围观

问DNA提取过程中内源性核酸酶如何有效抑制？

lyang556

在提取内源核酸酶含量丰富的材料的 DNA时,可增加裂解液中螯合剂的含量,细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔。

3 回答949 围观

问最近贴壁细胞传代，胰酶消化到光镜下细胞脱落到大片成团终止消化，吹打离心重悬，但传好的培养瓶里总是有成团的细胞没散开，是什么原因呀

whilt-shirt

这种情况一般是没有完全吹散，建议反复多次吹打

3 回答505 围观

问WB跑胶条带跑不开是什么原因呢？

whilt-shirt

有可能是胶的原因，建议选择相应浓度的分离胶

3 回答284 围观

问大鼠三叉神经节在什么位置？

dxywode

你可以参考一下文献，希望对你有帮助。

4 回答3829 围观

问DNA的检测结果可以通过外界（如药物）进行人为干预吗？

dxywode

可以的，通过研究人类的DNA，对可能发生的疾病进行提前预知，研发出个性化的DNA药物，可以让人类延长生命。

5 回答384 围观

问发现细胞里有一些小的团块贴壁不知道是不是污染了？

Keven轩

应该是真菌污染，及时扔掉然后清洗培养箱

4 回答370 围观

问真菌DNA提取时能否患酶呢

dxywode

用CTAB法非常好，不用酶类，而且效果很好，我就是用这个提的。

3 回答373 围观

问PCR试验中双链互补的问题？

bamboopiggy

在CpG岛两端设计引物进行PCR，pcr过程中，随着pcr引物的延申，T的互补生成A，C的互补生成G，不会不互补

3 回答573 围观

问RNA提取结果，遭遇亮区干扰，咋办(・o・)

bamboopiggy

你跑的是动物组织还是植物组织？用的是变性胶还是非变性胶？尝试用RNase处理一下看看还有没有，如果没有，可能是28S降解，如果有，可能是DNA或蛋白质污染。

3 回答458 围观

问菌液pcr检测重组质粒跑出来条带很弥散，是怎么回事，胶没问题

bamboopiggy

菌落pcr 条带弥散没什么，因为菌落里很多杂七杂八的东西，只要你要的目的条带能出现就可以。或者也可能是你的buffer，或者是胶配的不匀，感觉你的marker也有点弥散

5 回答3115 围观

问细胞真菌污染怎么避免，如果已经污染了，通过pbs洗有用么

未来9

真菌污染预防方法：1)，将细胞移出来，用微量硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里加适量硫酸铜或者酸氢二钠高盐液体防止霉菌2)孵箱应定期清洁，大约一个月左右清洁一次，3)可在培养基里加两性霉素或制霉菌素)或[放线菌素D或双抗进行预防。4)最主要的还是要培养良好的无菌观念，实验室尽量不要大声说话，佩戴好口罩，手套，操作时应小心，避免培养基撒入培养箱以及生物安全柜，这些撒入培养箱的培养基为细菌及真菌的

5 回答458 围观

问MKN45细胞不太好消化,大约消化多长时间才合适，如果消化损失过多会导致污染么

dxywode

消化我一般都胰酶在37°消化4分钟后，才能消化下来。就只能这么养，现在已经传了好多代。

6 回答570 围观

问用BioRad跑RT-PCR，不同的SYBR跑出来的GAPDH会有很大差别么，一个15+一个18+，但是样品差不多，选择哪个

whilt-shirt

可能是试剂的稳定性不太好，建议重新跑一板

3 回答425 围观

问细胞培养过程中如何保持细胞的低分化状态？

未来9

动物的细胞在细胞培养过程中只能增殖不能分化，在实验室养了无数次细胞,既不会分化，也不会无限增值，正常50代左右。癌细胞可无限增殖，但也不会分化。动物细胞的培养有各种用途，一般而言，动物细胞培养不需经过脱分化过程

3 回答206 围观

问想比较多个样本中单个细菌的丰度差异，用什么统计学方法？T检验可以吗？如果样本太多，会不会造成I类错误？

Keven轩

T检验没问题，其他的检验方法合理的都可以

3 回答528 围观

问在构建质粒时，菌落pcr的条带都是对的，但是测序结果都是缺少目的基因那一段，这是为什么呢？

汤姆卜丽波

可以做个菌液pcr再看看，有很大可能性是连接产物中有剩余目的基因，也可以单扩一个引物看看是不是引物污染，提个质粒跑一下

7 回答1327 围观

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