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        测序结果为什么看不到我克隆的酶切位点?

        相关实验:痘苗 DNA 检测实验

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        dxy_toiwpua

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        8 个回答

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        Junego

        有帮助

        测序引物距离你的酶切位点有多长?如果引物到酶切位点过近或太远都测不到的。一条引物测序结果可信长度就700-800bp,要不换条引物试试。

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        dxy_oeu11rar

        有帮助

        如果用的是同源重组法构载,看不到酶切位点是正常的,因为在线性化载体的过程中所选的酶切位点就被破坏掉了

        user-title

        灵枢天问

        有帮助

        可能发生了突变,或者验证出现了假阳性,引物特异性不足。

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        汤姆卜丽波

        有帮助

        要么是你的引物位置不对,要不然就是发生了重组

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        迟C迟

        有帮助

        你在给公司测序引物的时候可以距离目的片段远一点,测序结果前面一段不太准确,可能看不见目的基因起始片段序列。

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        bamboopiggy

        有帮助

        这要看你把测序引物放到了什么地方。如果测序引物离你的酶切位点在70-80bp之间。可能看不到,因为一般认为测序开始的那70-80个碱基是不准的

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        lyang556

        有帮助

        可能是克隆的酶切位点距离测序引物太近,开始一段序列很杂,几乎难以辨别,有可能看不清或看不到酶切位点。应当尽量选择距离酶切位点远点的引物。另外,样品出现意外原因,如空载、载体自连等,克隆的酶切位点也是看不到的。

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        未来9

        有帮助

        克隆的酶切位点距离您的测序引物太近, 开 始一段序列很杂, 几乎难以 辨别, 有可能看不清或看不到酶切位点。

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