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        如何用购买的阳性质粒制作转基因含量0.01%的阳性样品?例如:已知一个35s质粒,86bp,5微克,干粉。

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

        user-title

        dxy_i0adgw9

        用做荧光定量pcr方法验证中最低检出限的验证,也不知道验证检出限是不是这样验证的,谢谢!

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        3 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        可以参考一下这个专利:https://patents.google.com/patent/CN1718743A/zh

        本发明公开了一种转基因烟草检测方法,包括(一)巢式PCR定性检测:获得可用于PCR反应的样本DNA,同时检测样本的花椰菜花叶病毒启动子调控序列CaMV 35s、根癌农杆菌终止子调控序列nos和抗卡那霉素选择标记基因序列NPT II,引物的核苷酸序列见序列表SEQ ID No.1至SEQ ID No.12;对检出为转基因阳性的样本,进一步采用:(二)荧光实时PCR定量检测和(三)目的基因PCR检测。本发明还公开了一种检测转基因烟草的试剂盒,由定性检测试剂、定量检测试剂和目的基因检测试剂组成。本发明的优点是:该方法重复性好,可靠性高,检测费用低,省时省力;试剂盒灵敏度高、特异性强、操作简便,便于实现转基因烟草检测的规范化。

        user-title

        灵枢天问

        有帮助

        先把质粒融了,然后0.01%是指体积吧,还是摩尔质量?根据说明书把干粉溶解,然后如果是体积那就按平时配液的方法来稀释就可以了吧

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        可以参考下这个文章https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/show?paperid=98e4a5bf6892360264485402947fce77

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