• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        Tag1酶酶切后失败的原因?

        相关实验:酶切实验

        user-title

        心细北方

        用磁性微球提取人全血基因组DNA,提取的DNA用Tag1酶酶切,但发现酶切后产生的是smier片断,什么原因?

        wx-share
        分享

        7 个回答

        user-title

        mxy5120

        有帮助

        限制性内切酶的量不够。酶切的时间不充足

        user-title

        灵枢天问

        有帮助

        选择的酶是单一位点的么,如果不是肯定出现这种情况

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        可能是本来就有很多酶切位点,所以切开了全是片段

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        可能是由于加的限制性内切酶的量不够。酶切的时间不充足。质粒DNA的质量。限制性内切酶的活性。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        看你Tag1酶的说明书。酶切的量和时间。另外也不排除你dna没有提好

        user-title

        lyang556

        有帮助

        这个不叫失败,因为基因组中存在大量Taq1酶的酶切位点,酶切时是随机的,所以得到的DNA也是随机的,而不是大量均一的.那么电泳后的出现这样的结果也很容易解释.

        user-title

        未来9

        有帮助

        酶切失败的原因有哪些呢:

        1.甘油浓度过高:甘油浓度过高会导致星活性。星活性是指在非理想的条件下,内切酶切割与识别位点相似但不完全相同的序列。由于酶一般保存在甘油里,所以多加酶的同时会导致体系内甘油浓度变高,从而导致星活性。

        2.用于酶切的PCR产物或者质粒浓度过高:一般来说,在一个20μl的反应体系中,1μl的酶在1X 缓冲液终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA,如果是快切酶15分钟即可。但是如果用于酶切的PCR产物或者质粒浓度过高,会导致切不干净。

        3.DNA序列发生甲基化:原核细胞为了保护自己,选择性地降解外源DNA,可保护个体免于外来DNA(如噬菌体)侵入的系统,主要由限制内切酶和甲基化酶组成的二元系统。



        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序