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问
实时定量PCR的一个小问题?
未来9
SYBR GreenⅠ较另EvaGreen的标准曲线误差较大,且样品间分散度也较大。在定量PCR中饱和染料EvaGreen的定量效果好于SYBR GreenⅠ。
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问
小鼠小肠固有层淋巴细胞提取细胞量都很少,综合了很多文献中的方法,细胞量依然达不到?求大家的建议。
秋秋欣欣
消化液要用不含钙离子的,均匀缓慢加入
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问
双荧光素酶的酶标仪使用
bamboopiggy
你要看你用的是那个厂家的仪器啊,这个一般第一次做,可以咨询平台的老师,或者找个做过的人带着你做,别自己去乱鼓捣。
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问
做蛋白组学Prm样本要设定几个重复,重复数在结果中怎么体现?重复数会影响审稿吗
balalaLy
至少3个,重复数体现在统计数据的bar值
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问
核酸空白体系出现翘尾该怎么处理?
bamboopiggy
看是不是这个孔有问题,或者是你污染了?
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问
K599发根农杆菌注射大豆子叶,为什么只长愈伤不长根
dxy_g9y5gije
首先考虑植物激素使用问题,植物组织培养过程中,植物激素的使用顺序及比例都会影响结果,植物组织培养过程中,若只分裂而不分化出芽和根,其可能原因是细胞分裂素和生长素配比不对,你查查文献,看看人家都激素使用
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问
救救,WB苦手又来了,几乎所有条带都这样,没有蛋白,背景脏~
天一湖医者
背景脏不一定是因为仪器不干净造成的,也有可能是蛋白降解或者整个实验过程中条件不合适造成的。
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问
多重PCR可以分开做吗?十六对引物就做十六孔,都是同一次逆转的cDNA,然后一起扩增
balalaLy
如果是要样品或者组别之间进行比较最好一起做或者至少每次做都有可以相互比较的组别。
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问
想用流式测小鼠结肠巨噬细胞线粒体ROS含量,在细胞处理的时候需要加破膜液吗?
bamboopiggy
仔细看你用的ros的kit的说明书,说明书会提到的
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问
qPCR部分扩增条带不显示cp值?
汤姆卜丽波
可能是加样问题或者八联管出了问题
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问
新冠病毒核酸检测质控品怎么稀释浓度
亦书甜恬
目前国内新冠质控品都是非定值质控品,按非医疗器械管理。所给的不同水平量值有单位水平也有数值,只能当做参考。根据你的试剂检测下限200copies/ml,那要得到的靶浓度应该是300-600,考虑到操作方便性,日常工作使用时直接按2.5倍稀释为宜,得到靶浓度为556copies/ml。检测时核酸提取加样量通常为200ml,实际稀释操作80ml质控品原液+120ml稀释液即可。以上供参考。
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问
求助!求助!
汤姆卜丽波
哪个?指示剂下面的那条么,都有的没关系
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问
kcl切胶回收蛋白
balalaLy
很有可能是你的buffer出现问题
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问
流式和wb结果有差异
汤姆卜丽波
首先流式和wb抗体不一样,不能混用,还有就是你要明确你的蛋白表达量怎么样,流式不适合检测低表达的蛋白,低表达的还是采用western(尤其是化学发光底物更佳)和免疫组化更好。当然,流式最大的一个特点就是,可以定量(百分比),如果是高表达的用流式细胞仪非常有优势。
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问
WB跑胶时同时显示V和mA
汤姆卜丽波
一般是看左边的指示灯,你这个是74mA跑过来的
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问
染料法绝对定量,为什么扩增曲线和熔解曲线都有,但是测不出Cq值
汤姆卜丽波
这个扩增曲线就有问题,8-9个循环就到平台期了,曲线也不光滑,看看是不是模板浓度的问题,还有你的酶用对没
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问
各位有见过 lnc与蛋白同名的吗
汤姆卜丽波
一般不会同名,这种情况可能就是公司说的那个原因
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问
3T3-L1诱导时细胞的空隙很大,越诱导越大是什么情况呀
汤姆卜丽波
是不是加诱导剂的问题,细胞状态是对的,3T3L1加诱导剂后比较脆弱,一定要轻轻加,用移液器
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问
wb条带出不全,35kD以下蛋白都是空白,求指导
渐雨渐雨
有试过把胶倒过来转膜,但是仍然大分子的能转过去,小分子的消失。转膜用的是0.45的PVDF膜。分离胶和浓缩胶的比例也测试过,试过1:1和3:7的,但仍然是这个样子。分离胶有试过10%、12%、15%的,小分子仍然出不来。
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问
生信分析和meta分析有什么不同
yanlai000
生信分析是原始数据挖掘,基于高通量大数据挖掘分析,比如差异分析、富集分析、聚类分析、蛋白互做分析、预后分析等,是基础生物科研范畴,主要数据是原始芯片、测序等的高通量数据。meta分析属于文献二次挖掘,各领域都可以做,基本思路就是把别人的文章里的数据合并整理算一下总体效应量,其属于文献挖掘,举个例子:A研究了100人发现西瓜好吃,B研究了50人的结论却相反“不好吃”,C研究80人发现“不确定”,D说
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