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问
请问,我提出来的RNA浓度很低只有18ng/ul,od值也是1.7几,是不是提出来的是蛋白质,不是RNA,有谁出现这种情况吗?
bamboopiggy
你看你读的od值是什么数值的?260/230还是260/280?
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问
qpcr用水代替模板上机,结果仍然有曲线,是引物的问题还是被污染了?
bamboopiggy
可能是引物二聚体,也可能是水被污染了,这个要更换其中一个进行判断
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问
小鼠脑部小胶质细胞免疫荧光
bamboopiggy
我看着你这个图可以,你可以参考一下人家文献里的图片,或者是你选的位置改改
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问
为什么转化涂板后第二天菌落长的特别多,老师说是不对的?
bamboopiggy
你是质粒转化,还是连接产物转化?如果是质粒,是可以的,如果是连接产物,那一般是假的
3 回答
2266 围观
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问
PCR溶解曲线虽然为单峰,但峰看起来有点宽说明什么?
bamboopiggy
说明你的 引物不特异,有两个size差不多大小的产物产生
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问
荧光定量PCR的基线,是怎么确定的呢?
bamboopiggy
基线就是一开始基本没有读值的那些线啊,你说的应该是读CT值得那个threshold 线吧,那个就是斜率最大得地方,的一条线,现在基本由机器自己去判断了
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1844 围观
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问
想问一下,在wb时,配制5%的脱脂奶粉,有的用pbst稀释有的人用tbst稀释,两个缓冲液有什么区别吗?
bamboopiggy
都是缓冲液,问题不大,我 喜欢用pbst,因为不需要调ph值,tbst是需要调ph值得,但是有人说tbst对磷酸化得蛋白好。
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问
基因测序结果有两个碱基突变,还可以用吗
府宅
如果是表达的话,只要氨基酸序列没有改变,接下来的实验还是可以继续的,如果在其他区域,如果此位点不是你的核心区域,个人认为影响不大。
4 回答
1758 围观
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问
自己制胶跑出来经常歪歪扭扭,怎样才能把胶跑的非常漂亮?
bamboopiggy
不能急,一定要把胶混匀,且彻底凝固后,再用
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1037 围观
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问
为什么提高大分子量蛋白的转移的时候,小分子量蛋白会丢失一些哪?什么原因?
bamboopiggy
小分子量的蛋白跑的比大分子量的快,如果为了得到更多得大分子量蛋白,会是小分子量得蛋白穿过膜,丢失了
3 回答
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问
WB实验目的蛋白空白,但是marker很明显,为什么?
bamboopiggy
marker明显至少转膜是转过去的了,会不会是条带位置不对?
3 回答
2390 围观
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问
跑wb出现这种情况,是怎么回事?没有条带,全是黑点点……
秋秋欣欣
是不是转膜的时候,膜活化之前被污染了。
3 回答
725 围观
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问
肿瘤组织提蛋白跑WB不齐
balalaLy
组织取出来后称重,每个组取等质量的组织
5 回答
1481 围观
5 回答
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问
小鼠造模打完肿瘤细胞后量瘤子忽大忽小,什么原因?
汤姆卜丽波
可能是种的时候引发了炎症,一直在炎症反应,不断的反复吸收
4 回答
2243 围观
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问
input有带,但是ip部分互作的部分没有带
balalaLy
如果确定蛋白有互作的话可能是提蛋白的过程出了问题,比如所用的裂解液太强了,影响了两个蛋白的结合导致拉一种蛋白的时候另一个没有一起拉下来
4 回答
673 围观
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问
lncRNA使用shRNA敲低后使用什么方法回补效果比较好?
秋秋欣欣
pcDNA过表达就行,普通的也不会有影响
2 回答
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问
质粒转染中,在不对细胞活率影响下,平均单个细胞能承受多少拷贝质粒,或多少质量的质粒?
汤姆卜丽波
一般单个细胞根据质粒的大小来看,转染效率比较好的话可以接受2-3个,差不多的话基本一对一
2 回答
881 围观
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问
A549细胞到底是如何形态
bamboopiggy
人非小细胞肺癌的细胞,是由D·J·Griad通过肺癌组织移植培养建系,源自于一位58岁白人男性
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1396 围观
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问
请教Proteome profiler array是什么分析
汤姆卜丽波
Proteome Profiler即血管生成蛋白芯片抗体,芯片为同时检测单个样品中多个分析物的相对水平提供了一种快速、灵敏而又经济的工具。这种芯片的使用不需要特殊的仪器,也不需要进行多个免疫沉淀或者Western blot实验。每个芯片在设计时都采用精心挑选的捕获抗体,并在硝酸纤维素膜上重复点样两次。这些膜与实验样品以及包含生物素化检测抗体混合物共同孵育,随后加入辣根过氧化物酶(HRP)偶联的链亲
3 回答
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问
ros荧光探针
汤姆卜丽波
根据你的荧光,重新设置一下激发光长度
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