AspirinL3QN
最近对于一个胞内蛋白,我做wb趋势很棒,但是做流式发现对照和处理组完全没区别,请问这可能是什么问题。我第二次做流式,是样品处理问题吗,是一抗加的太多吗?我一百万个细胞大约1微克抗体
汤姆卜丽波
首先流式和wb抗体不一样,不能混用,还有就是你要明确你的蛋白表达量怎么样,流式不适合检测低表达的蛋白,低表达的还是采用western(尤其是化学发光底物更佳)和免疫组化更好。当然,流式最大的一个特点就是,可以定量(百分比),如果是高表达的用流式细胞仪非常有优势。
bamboopiggy
wb结果有差异那就是有差异,可能你流式样品处理,尤其是破膜那一步有问题
balalaLy
可能是流式操作和细胞处理的过程出问题了。
秋秋欣欣
可能是流式的细胞量不够,流式细胞稍微多一些结果温度一点
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