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wb条带出不全,35kD以下蛋白都是空白,求指导

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渐雨渐雨

最近的条带都出现了这种相同的问题,更换过抗体仍然没有出现过条带。

电泳条件为80V 100min,电转条件为72V 60min,上样量为30μg。

不清楚是什么原因导致的这种问题,有没有什么办法解决?万分感谢!

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6 个回答

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渐雨渐雨

有帮助

有试过把胶倒过来转膜,但是仍然大分子的能转过去,小分子的消失。

转膜用的是0.45的PVDF膜。

分离胶和浓缩胶的比例也测试过,试过1:1和3:7的,但仍然是这个样子。

分离胶有试过10%、12%、15%的,小分子仍然出不来。

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bamboopiggy

有帮助

是不是你转膜的夹子变形了?你转膜的时候把胶倒过来试试,上面的会不会出不来

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yanlai000

有帮助

分离胶浓度不知道你是多少的,你可以试试10%的

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balalaLy

有帮助

转膜用的是什么膜?如果是尼龙膜的话小的可能转过了

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汤姆卜丽波

有帮助

有可能是配胶的时候分离胶和浓缩胶的比例不太对

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秋秋欣欣

有帮助

如果需要分子量低的蛋白可以用浓度高一点的分离胶

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