wb条带出不全，35kD以下蛋白都是空白，求指导
渐雨渐雨
最近的条带都出现了这种相同的问题，更换过抗体仍然没有出现过条带。
电泳条件为80V 100min，电转条件为72V 60min，上样量为30μg。
不清楚是什么原因导致的这种问题，有没有什么办法解决？万分感谢！
6 个回答
渐雨渐雨
有帮助
有试过把胶倒过来转膜，但是仍然大分子的能转过去，小分子的消失。
转膜用的是0.45的PVDF膜。
分离胶和浓缩胶的比例也测试过，试过1：1和3：7的，但仍然是这个样子。
分离胶有试过10%、12%、15%的，小分子仍然出不来。
bamboopiggy
有帮助
是不是你转膜的夹子变形了？你转膜的时候把胶倒过来试试，上面的会不会出不来
yanlai000
有帮助
分离胶浓度不知道你是多少的，你可以试试10%的
balalaLy
有帮助
转膜用的是什么膜？如果是尼龙膜的话小的可能转过了
汤姆卜丽波
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有可能是配胶的时候分离胶和浓缩胶的比例不太对
秋秋欣欣
有帮助
如果需要分子量低的蛋白可以用浓度高一点的分离胶
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