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问
WB核蛋白和胞浆蛋白可以分开跑吗还是必须在一块胶上面跑哇
土井挞克树
可以分开跑,W B实验相对来说操作自由度高。
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问
悬浮细胞转染以后需要换液吗
bamboopiggy
这个取决于你用的什么转染方式啊,如果用lipo2000,要换
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问
WB转膜结束后25kd以下的地方总出现粉红色染料印记,请问是怎么回事?另外如何提高心脏组织蛋白提取质量?
土井挞克树
有可能是抗体交叉反应,说明抗体纯化不足。
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问
请教小鼠坐骨神经损伤模型(SNI)相关问题
土井挞克树
SNI小鼠模型包括结扎坐骨神经三个分支中的两个(胫神经和腓总神经),而腓肠神经保持完整的。
2 回答
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问
Trizol法提取活细胞RNA,离心后,中间层离到管壁上是怎么回事
junyong151
目标分子在上清中,只要确保整个操作过程中样本没有被污染即可,中间层离到管壁上应该是和离心过程有关。
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问
请问具体的oc43扩毒方法是什么?这个病毒解冻方式是37度解冻,还是4度解冻呢?能反复冻存吗?反复冻存影响大吗?
土井挞克树
个人觉得缓慢解冻比较好,4度解冻
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问
冠状病毒OC43种细胞上,变浑浊了,是细胞污染了吗,对照组没有变化!
土井挞克树
考虑使细胞污染了,可能是病毒有可能是其他微生物。
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问
有哪位大神知道,能表达TRPV3的结肠细胞株吗?
土井挞克树
你可以查一下MC-38这个细胞株。
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问
narodrop怎么测蛋白浓度?
bamboopiggy
在nanodrop启动页面上,有测蛋白浓度的那个选项
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问
植物RNA提取260/230吸光值过低,只有0.08是什么原因?
土井挞克树
260/230比值偏小,是有盐污染,解决的办法是:在乙醇洗脱步骤时:1、75%乙醇,4℃,7500g/min,离心5min;2、倒掉乙醇,再加入75%乙醇,条件同上,做第二次洗脱(注意,这次EP管在离心机里的摆放方向与第一次相反,以便能更全面的洗脱);3、再次掉转EP管在离心机中的方向(不再加入乙醇),7500g/min,4℃,离心3min 后,用200μl的枪小心吸去乙醇(注意不要吸到管底的RN
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问
请问各位大佬这样的曲线前面好杂乱是怎么回事啊
土井挞克树
有可能是有一些小污染,导致在起始方向存在误差。
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问
这是真菌污染吗?还是死细胞
此用户已注销
这是污染了,细胞死了不是这样的
3 回答
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问
为什么细胞J774.A1长的慢
bamboopiggy
没看到图,但是这个细胞是鼠的单核巨噬细胞,对血清要求比较高,你试试换个好点的血清
3 回答
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问
细胞被霉菌污染了吗?
dxy_nmruyr00
应该是,需要全面清理,真菌容易繁殖
3 回答
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问
如何根据保守序列设计简并引物?
junyong151
设计简并引物至少需要上下游各有一个保守区域, 且两个保守区域相距50~400个氨基酸残基为宜, 使得PCR产物在150~1200bp之间,最重要的是每一个保守区域至少有6个氨基酸的保守区,因为每条引物至少18bp左右。若比对结果保守性不是很强很可能找不到6个氨基酸序列的保守区,这时可以根据物种的亲缘关系,选择亲缘关系近的物种进行二次比对,若保守性仍达不到要求,则需进行三次比对,总之,究竟要选多少序
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问
Li-7细胞培养问题
芹菜韩
复苏后的细胞静观1小时后活力强盛
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问
HPA应该怎么用?
NatureBios
HPA可以作为参考,因为它的结果对应单独的抗体结果,每个抗体做出来的结果有时会有差异,他有一定的参考价值,其中17年有篇文献使用多家抗体同一个指标做敲除验证,结果只有一家抗体可以完成实验,对于实验结果的准确性,我们或可以使用多家抗体相互验证或设置敲除过表达或刺激验证,增加实验结果的可信度
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762 围观
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问
求助:WB条带背景太黑 是什么原因呀
balalaLy
marker转膜成功说明前面的步骤应该都没有问题,唯一不能确定的是你的蛋白有没有提取成功。另外,抗体4度保存一个月肯定不行了吧。你的实验从配胶的试剂到抗体都是有各种不确定性,作为新手菜鸟,这么操作你可能要走完所有的坑你才能做出比较漂亮的结果哦。建议你先借别人的可以用的蛋白和抗体跑一下。
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问
WB的样品蛋白浓度过低怎么办?
bamboopiggy
只能换大孔胶,但是你可以设一个每块胶上都有的标准品,然后读值的时候,都和这个标准品进行比较
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问
组化笔固定前画圈还是封闭后加一抗前画
灵枢天问
我们是敷一抗前画,保证抗体覆盖
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