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问
CasRx系统引物设计
土井挞克树
1.sgRNA设计1.1设计原则1) II型CRISPR系统(SpCas 9)的sgRNA 靶点一般为20nt2)sgRNA序列的碱基组成:基因特异的sgRNA 模板序列位于PAM 序列前,PAM序列的特征为NGG (N可以为任意核苷酸)3)sgRNA的序列应避免以4个以上的T结尾,GC%含量为30%-70%4)sgRNA的序列与On-target和Off-target的匹配数都应尽可能的高。5)
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问
大佬们,请问我跑了好几次,看着maker挺好,但是样本条带就是显不出来,这是样本纯度问题吗
秋秋欣欣
样本条带不清楚也可能是你的样本浓度低
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问
wb出问题了
土井挞克树
可能是非特异性结合,或者你的样品中有蛋白酶
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问
制胶关键点,是否可以使用无水乙醇消除小气泡
balalaLy
水、乙醇、异丙醇都可以用,其实效果都差不多
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问
求助三种DNS试剂区别
土井挞克树
推荐你看这片张海健的文章,里边说明的很详细。
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问
想咨询一下各位大佬,从植物中提取的蛋白多肽怎么能提高它的浓度了,
土井挞克树
会破坏蛋白结构,不建议这么做。
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问
求助脑HE切片怎么看,这些细胞和组织正常状态等,有学习资料可以提供吗?
土井挞克树
HE染色是一种组织病理的染色方法,通过这个染色可能明确的区分出组织以及细胞的结构。HE染色,既是苏木素伊红染色法,是最常用的染色方法。在质量较佳的HE染色切片上,各种组织或细胞的一般形态及特点都可以观察到。苏木素染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
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问
自己做的兔抗多克隆抗体,在目的条带的位置出现非特异性条带怎么解决
土井挞克树
这样就需要调高筛选精度,尽量把非特异性条带筛选掉
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问
激动剂预处理操作
土井挞克树
两小时这个时间略短,你在两小时时可以观察然后根据效果适当延长。
2 回答
1075 围观
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问
96孔板 细菌的时间杀伤实验
土井挞克树
抗生素什么时间加的,尝试减少抗生素量!
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问
Caco2单层膜建立
土井挞克树
需要检测系数,如果数据可以的条件下可以用。
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554 围观
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问
细胞周期
土井挞克树
吹打时间尝试延长一下,把粘连吹打下
1 回答
668 围观
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问
细菌细胞共培养如何做CCK8?
土井挞克树
还是推测是操作中的问题,排除材料的问题可能是时间,温度等影响
2 回答
1588 围观
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问
脂多糖 caco-2 cck8
土井挞克树
不正常。一般这个浓度已经足够诱导了
1 回答
844 围观
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问
血液或尿液中造影剂的含量可以测定吗?
土井挞克树
可以的,可以测量半衰期以及清除率等
2 回答
684 围观
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问
CHO细胞培养及转染效率低的问题
土井挞克树
实验室微生物系统怎么样,检查一下培养基
1 回答
1036 围观
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问
qPCR标曲低浓度曲线分不开,模板超声没用
土井挞克树
建议更换引物探针,高重复性容易导致曲线不明显
3 回答
799 围观
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问
我细胞状态挺好,但是就是不长并且在瓶子上还死了一些(sf21,悬浮细胞,27℃220rpm培养的)
土井挞克树
可以在显微镜下观察是否有污染,这种情况可能有杂质污染
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409 围观
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问
磷酸化和总蛋白变化趋势一致
土井挞克树
老外的文章,总蛋白和磷酸化蛋白一般都会做WB。对结果的解读,以下意见,供参考:(1)内参一致,总蛋白不变,磷酸化蛋白表达升高或者降低:说明经过某种处理(外部操作,抑制剂,上游蛋白基因敲除或者siRNA等)后,对该蛋白(及其代表的信号通路)的活性产生影响(促进或抑制);(2)内参一致,总蛋白升高或者降低:说明经过实验组的处理方法能够诱导总蛋白的表达或者降解。至于磷酸化活性的变化,和总蛋白的表达高低有
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问
ELISA检测,稀释液OD值比原液高
圆圆v5
如果不是因为原液浓度太高导致HOOK了所以不显色,那就考虑这个ELISA是不是竞争法的原理,有些竞争法表现为浓度越高越不显色,这个可以对照定标曲线看出来。
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