实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问这个是什么原因啊？是转膜温度太高了吗？但是并不是特别热啊只是稍微热一点点🤏

秋秋欣欣

也可能是蛋白的问题，有点弥散。

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问想请教一下各位前辈，做癌细胞靶向耐药相关实验，为什么逆转剂用的浓度是IC10呢，可以用IC50吗

土井挞克树

不建议，因为后续计算逆转倍数时，逆转倍数是ic50/ic50，分子为不加逆转剂的浓度。所以在逆转剂的浓度一般用ic10

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问万能的网友们！为啥跑WB的时候，样品会漏到玻璃板之间的空隙内啊😭😭😭😭

秋秋欣欣

这很明显就是胶的问题了，重新配胶看看

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问冰冻切片组织脱水方式及时间如何确定

huarenqiang5

脱水：依以下酒精梯度进行脱水，30%乙醇→50%乙醇→70%乙醇（关键步骤：可当日2H也可过夜）→95%乙醇1→95%乙醇2→无水乙醇。根据不同组织大小和类型调整脱水时间，对于小鼠肝组织95%乙醇控制在30min-1H，100%乙醇5min-30min。

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问如何查找某个基因的基因沉默序列腺病毒？

huarenqiang5

基因沉默分为转录水平的沉默（TGS）和转录后水平的沉默（PTGS）。TGS是指转基因在细胞核内RNA合成受到了阻止而导致基因沉默;对于部分植物来说,转基因引发的基因沉默可能是因为基因特异的甲基化而导致;PTGS则是指转基因能够在细胞核里被稳定地转录,但在细胞质里却无相应的mRNA存在这一现象。RNAi、共抑制、 quelling均属于PTGS。病毒基因、人工转

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问甲醛滴定法测定蛋白质水解度？

huarenqiang5

下面标注的有，n0是水解前每克蛋白游离的氨基酸毫摩尔数（mmol/g）。

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问2，4-D生长素配成培养基的母液的时候，使用少量酒精可以溶解，但是加入蒸馏水后会有晶体析出，这是为什么呢？

sswei

可能温度发生改变或可能含有机物质。

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问细胞出现小泡泡是什么原因啊？

龙大人驾到

细胞传代出现气泡可能有多种原因，以下是几种可能的情况：1.复苏期新生细胞：在组织损伤或器官再生时，细胞会进入复苏期，此时细胞开始快速增殖，产生大量新的细胞。在这个过程中，细胞可能会出现气泡，这是由于新生细胞中的代谢产物积累而导致的。2.细胞培养中的气泡：在细胞培养的过程中，细胞与培养基中的气体进行交换，而一些气体可能会形成气泡。此外，培养过程中可能会出现污染或细胞损伤，这也可能导致气泡的产生。3.

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问southern blot转膜的速度和时间怎么把握

龙大人驾到

Southern blot转膜的速度和时间需要根据具体实验情况和转膜装置进行调整。以下是常见的建议和注意事项：转膜速度：转膜速度应该适中，不要过快也不要过慢。过快可能导致样品在膜上分布不均，过慢则可能导致Western转膜液不足，影响转移效果。通常建议转膜速度为10-20毫升/分钟。转膜时间：转膜时间也需要根据实验情况和转膜装置进行调整。通常建议转膜时间为1-2小时，但具体时间可能因实验所需而异。

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问氯霉素培养基要怎么配？浓度是34mg/ml 配1L一次就没了？（是不是）工作浓度∶严密型质粒25微克每毫升松弛型质粒170微克

龙大人驾到

配制氯霉素培养基的步骤如下：称取34克培养基粉末加入到1升去离子水中，充分溶解。加入氯霉素盐酸盐，将其溶解至所需浓度。根据您提供的信息，严密型质粒工作浓度为25微克/毫升，松弛型质粒工作浓度为170微克/毫升。因此，如果您要配制1升氯霉素培养基，需要加入25毫克严密型质粒和170毫克松弛型质粒的氯霉素盐酸盐。用去离子水调整溶液体积至1升，充分混合。

3 回答8286 围观

问DCA曲线问题

sswei

决策曲线分析是一种评估和比较合并临床结果的预测模型的方法，只需要对模型进行测试的数据集，并将其应用于具有连续或二分类结果的模型。因此，从该图形来看，难以做出合理的结论。

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问meta分析

sswei

由于分组的差异，导致结果的不确定。建议重新分组。

3 回答180 围观

问求助！汇集队列方程预测风险用的哪个软件啊啊

龙大人驾到

如果需要对队列方程进行汇集和分析，可以考虑使用以下软件：MATLAB：MATLAB是一种高级数学计算软件，可用于解决各种数学和工程问题，包括队列方程分析和汇集。R：R是一种广泛使用的开源统计分析软件，可用于分析和可视化数据，以及进行队列方程分析。Python：Python是一种流行的编程语言，可用于编写脚本和程序，包括队列方程分析和可视化。

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问umbrella review

龙大人驾到

95% PI (prediction interval)：预测区间。它是对于未来一次独立的实验结果的预测，根据已有的研究结果建立的一个区间，通常用于评估一个新研究的结果是否与已有的结果一致。Small-study effects：小样本效应。指在meta分析中小规模的研究结果可能对整体结果产生较大的影响，因为小规模的研究更容易受到随机误差的影响，从而产生不一致的结果。Largest study s

3 回答477 围观

问请教大家如何检测未表达基因的敲除/敲入效率

sswei

引入标记基因序列，便于目的基因的示踪和定位，或引入调控表达元件如增强子，调控目的基因的表达。

4 回答424 围观

问spss 多组间不同观察节点的比较

sswei

重复方差分析要求复合对称，该条件往往不能成立，并且求对称检验在小样本是效能低，在大样本又总能得到不对称的结果，因此并不是很好，现在认为该检验比较保守。重复测量方差分析确实简单，所以还是很多人用。但是现在已经不是routine method了。

4 回答591 围观

问文章问题

sswei

可能通过调控ST2细胞内ephrinB2/EphB4信号促进骨形成。

4 回答171 围观

问meta分析检索词求助

龙大人驾到

可以通过限制条件来精简检索结果，从而使得检索结果更加符合需求。在使用EMBASE数据库进行文献检索时，可以通过添加限制条件来筛选出符合要求的文献。两个常用的限制条件是“humans”和“clinical study”。这些限制条件可以用于筛选与人类相关的文献，并且要求研究必须是临床研究。使用这些限制条件可以减少检索结果数量，并使检索结果更加具有针对性。具体操作步骤如下：在EMBASE的检索栏中输入

3 回答463 围观

问小鼠新生24h皮质细胞原代培养，混合胶质细胞第4天，请问这个圆圆的细胞是什么细胞？

牧moon

第二天就贴壁了，应该不是小胶质，但是第四天应该也有小胶质了，在星胶上面

3 回答335 围观

问293T细胞之间出现异常的白色小空泡

惊鸿曾照影

有可能是细胞碎片，不建议使用。

7 回答996 围观

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