co-ip时出现的IgG重链条带怎么解决

换另外一种二抗的IgG，是非特异性结合

用抗 Fab和Fc的抗体特异性封闭重链。

解决如下:

1) Co-IP抗体共价偶联到磁珠或者Agarose上——这样在洗脱的时候，抗体就不会被洗到CoIP产物中去。

2) IP-WB检测一抗直接标记HRP，WB实验过程中不使用二抗——这样就不会发生二抗识别CoIP产物中一抗抗体。

3) 使用一款只识别天然构象抗体的二抗——由于WB过程中，CoIP产物中一抗抗体变性，该二抗不会识别产生条带。

在共免疫沉淀(co-IP)实验中，出现IgG重链带可能是由于非特异性结合或污染所致。以下是一些可能的解决方法：

更换抗体：尝试使用不同来源或纯度更高的抗体，或者选择另一种抗体进行共免疫沉淀。

预清洗抗体：在进行共免疫沉淀之前，对抗体进行一定程度的预清洗，可以减少污染物的存在，例如使用无静电吸附管或清洗介质。

加入阻断剂：加入非特异性结合抑制剂，如BSA、鱼精蛋白、milk，可以降低IgG重链的结合。

选择不同的条件：尝试不同的共免疫沉淀条件，如不同的缓冲液、盐度、pH等，来减少非特异性结合。

进行对照组实验：进行阴性对照组实验来确定IgG重链的出现是否是由于特异性结合。例如，通过使用与靶蛋白无关的抗体作为对照，观察是否存在IgG重链的带。

如果以上方法都不能解决问题，还可以考虑使用其他的蛋白质相互作用技术，如GST pull-down、Far-western blotting等。