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        免疫荧光共定位,需要做半定量分析吗?

        相关实验:细胞免疫荧光

        user-title

        rainbaby0

        请教大家:

        我做两个蛋白的共定位实验,用的是细胞免疫荧光染色,做了共定位分析。但是审稿人说应该做定量分析。我就想不明白是什么意思了?共定位检测,需要做定量分析吗?而且免疫荧光染色本身做定量分析就不准确吧?

        求助大家!非常感谢!

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        4 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以做定量,用荧光吸收波的荧光强度做定量分析

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        共定位分析可以检测两个蛋白是否在同一亚细胞定位,并可以通过免疫荧光染色来直观地观察它们的共定位情况。但是,如果需要证明这两个蛋白之间的共定位程度的强度或数量关系,就需要进行定量分析了。

        定量分析可以使用图像处理软件或其他定量方法,比如荧光标记的蛋白质在细胞中的比例或共定位区域的面积等。虽然免疫荧光染色本身存在一定的局限性,但是通过标准化的实验流程和准确的图像分析方法,可以获得可靠的定量结果。

        所以,如果审稿人要求进行定量分析,您可以考虑使用适当的方法进行定量,以证明共定位程度的强度或数量关系。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        你这个肯定得按审稿人的要求做呀,不然就不能通过审核。

        user-title

        sswei

        有帮助

        免疫荧光共定位分析本质其实就是分析不同荧光标记的蛋白(这两种荧光必须有独立的发射波长),在空间中的重叠,从而判断这两种蛋白是否处于同一区域,即在同一像素上是否“恰巧”出现了两种不同的荧光分子。共定位分析能间接地说明两个蛋白与同一结构有联系,但不是两种蛋白有相互作用的直接证据。

        免疫荧光定量分析是一种通过使用特定的抗体与待检测样本发生特异性结合,然后进行放射免疫结合(RIA)或者免疫荧光结合(IFA),以确定样本中目标物质的含量的定量分析方法。

        可能你的论文需要加用定量分析才更有说服力。

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