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        WB实验使用的膜哪种最好啊?

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        土井挞克树

        WB实验使用的膜哪种最好啊,PVDF好还是NC膜,两者如何选择?

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        3 个回答

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        Pvdf膜跟nc膜有的区别及选择:


        一、硝酸纤维素NC膜的优点


        1.使用方便,操作简单,兼容多种检测方法,与 PVDF 膜相比,不需要甲醇浸泡过程,这样使得那 些需要亲水环境下的蛋白质转移。在转移前,仅需要在水中简单润湿,然后置于转移缓冲液中,不 需要其他的预湿步骤了。


        2. 背景低:除了具有高结合力外,硝酸纤维素膜本身产生的背景非常低,膜特有的表面性质保证了 优异的信噪比,在膜洗脱时不需要严格的洗脱条件。


        3. 小分子蛋白的高截留率:硝酸纤维膜有多种孔径以供选择,按照不同的使用要求进行选择相应的 孔径的膜:


        0.22um 的硝酸纤维素膜通过小孔径来截留分子量小于 20kD 的蛋白质分子。


        0.45um 的膜 是较大分子蛋白和核酸的理想选择。


        0.1um 的膜常用于分子量小于 7kD 的蛋白质。


        4. 相对于pvdf膜保质期更长,可保存五年


        二、PVDF膜的优点


        1. 与硝酸纤维素膜相比,PVDF 膜有更好的蛋白质截留能力。硝酸纤维素膜的典型结合量是 80-100Mu g/cm,而 PVDF 膜结合量是 100-200Mu g/cm2(结合强度 PVDF 比硝纤膜强 6 倍)。


        2. PVDF 膜具有更好的机械强度和化学耐受性,这一特点使 PVDF 膜在各种染色应用和多重免疫检测 中成为理想选择。而且单个凝胶的泳道复本可用于多种目的,如考马斯亮蓝染色后切出条带并进行 N末端测序、蛋白消化/肽分离/内部测序和免疫检测。


        3. PVDF 膜有多种孔径以供选择,按照不同的使用要求进行选择相应的孔径的膜,随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于 20kD 的蛋白选用 0.45μm 的膜,小于 20kD 的蛋白选用 0.2μm 的膜。

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        一般都用PVDF膜,也有用NC膜的,但是有种说法是NC膜蛋白容易转过头

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        对于Western Blot实验使用的膜,PVDF和NC膜都有其优点和缺点,因此选择哪种取决于实验的具体要求和实验者的个人偏好。

        PVDF膜具有以下优点:

        PVDF膜比NC膜更耐久,可以进行多次的重复实验。

        PVDF膜对小分子蛋白的吸附效果更好。

        PVDF膜可以用于检测转移后的核酸和蛋白质,适用于多种蛋白质的检测,尤其是较小的蛋白质。

        NC膜具有以下优点:

        NC膜的背景噪音更低,可以提供更清晰的结果。

        NC膜对大分子蛋白的吸附效果更好。

        NC膜在检测蛋白质聚合物时有更好的效果。

        综上所述,如果你需要检测小分子蛋白质,可以选择PVDF膜;如果需要检测大分子蛋白质或聚合物,则建议使用NC膜。如果需要进行多次实验,可以选择PVDF膜,因为它比NC膜更耐用。

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