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        pet28a质粒dna提取浓度低

        相关实验:DNA 的酶切与连接

        user-title

        dxy_tphcsz00

        单菌落过夜培养16h后,取1.5ml去质粒提取,按照说明书进行提取,但是每次提取的都没有超过100ng/ul,跑胶看到很浅的一条线。是因为pet系列的都是低拷贝的吗?需要增加菌液量吗?

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        3 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        必须增加菌液量,目前来看就是上样量太少了,增加样本量

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        PET系列质粒一般都是低拷贝数的质粒,其拷贝数范围通常在1-10个拷贝/细胞之间,因此提取到的质粒DNA含量会比较低。此外,使用1.5ml的菌液提取质粒,一般也只能得到几十到几百ng/ul的DNA,因此您提取到的质粒DNA含量较低是正常的情况。

        如果您想要得到更高的质粒DNA含量,可以尝试增加菌液量,例如使用5ml或10ml的菌液进行质粒提取。此外,还可以尝试使用不同的质粒提取试剂盒,或者优化提取过程中的某些步骤,例如细胞破裂方法、DNA纯化方式等等,以提高质粒DNA的提取效率。

        需要注意的是,即使质粒DNA含量较低,也可以进行PCR扩增或者其他分子生物学实验,只需要在反应体系中增加相应的模板量即可。另外,您提到跑胶看到很浅的一条线,这可能是因为质粒DNA含量较低,建议您在电泳前增加负载样品量,或者增加电泳时间,以获得更明显的条带。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        你这个情况建议增加菌液量试试看。

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