pet28a质粒dna提取浓度低
dxy_tphcsz00
单菌落过夜培养16h后，取1.5ml去质粒提取，按照说明书进行提取，但是每次提取的都没有超过100ng/ul，跑胶看到很浅的一条线。是因为pet系列的都是低拷贝的吗？需要增加菌液量吗？
3 个回答
土井挞克树
必须增加菌液量，目前来看就是上样量太少了，增加样本量
loveliufudan
PET系列质粒一般都是低拷贝数的质粒，其拷贝数范围通常在1-10个拷贝/细胞之间，因此提取到的质粒DNA含量会比较低。此外，使用1.5ml的菌液提取质粒，一般也只能得到几十到几百ng/ul的DNA，因此您提取到的质粒DNA含量较低是正常的情况。
如果您想要得到更高的质粒DNA含量，可以尝试增加菌液量，例如使用5ml或10ml的菌液进行质粒提取。此外，还可以尝试使用不同的质粒提取试剂盒，或者优化提取过程中的某些步骤，例如细胞破裂方法、DNA纯化方式等等，以提高质粒DNA的提取效率。
需要注意的是，即使质粒DNA含量较低，也可以进行PCR扩增或者其他分子生物学实验，只需要在反应体系中增加相应的模板量即可。另外，您提到跑胶看到很浅的一条线，这可能是因为质粒DNA含量较低，建议您在电泳前增加负载样品量，或者增加电泳时间，以获得更明显的条带。
huarenqiang5
你这个情况建议增加菌液量试试看。
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