我要登录|
免费注册
|
我的丁香通
- 企业机构：
- 成为企业机构
- 个人用户：
- 个人中心
移动端

大家都在搜

0 人通过求购买到了急需的产品

免费发布求购

发布求购

实验问答

31,784,107 科研人在看

问96孔板如何确定合适的细胞接种密度和药物干预时间?

loveliufudan

确定适当的细胞接种密度和药物处理时间是细胞实验设计中非常重要的步骤。96孔板可以用来进行高通量筛选实验，其中可以同时测试多个样品以及不同处理条件下的细胞生长情况。以下是一些方法来确定适当的细胞接种密度和药物处理时间：文献调研：在设计实验之前，可以查找类似实验的文献来获取参考信息。通过文献中的描述，可以了解到哪些细胞类型适合在96孔板上进行实验、推荐的接种密度和药物处理时间等信息。实验前的预测试验：

5 回答5048 围观

问星形胶质细胞培养交流

loveliufudan

针对这种情况，建议可以采取以下措施：采用低速离心：如果实验需要离心，可以采用低速离心。低速离心可以避免对细胞的机械损伤，同时可以去除杂质和细胞碎片。选择适合的离心管或离心管衬垫：有些离心管或离心管衬垫比较适合星形胶质细胞的离心，可以避免细胞损失。可以向供应商咨询或者尝试不同的离心管或离心管衬垫。

2 回答739 围观

问CD4+T细胞rna提取浓度和纯度总是太低如何解决？

土井挞克树

更换提取方法，或者增加上样量。

3 回答1875 围观

问双荧光素酶实验裂解细胞前有必要用PBS清洗细胞吗？

土井挞克树

有必要，可以大部分清理掉污染和杂质的干扰

4 回答795 围观

问T载体连接转化后挑选阳性菌落跑菌液PCR，然后送测序，测序结果与参考序列比，长度少了100bp左右，这是为啥呢？

土井挞克树

考虑体系内存在降解，可能是在pcr过程中断裂

3 回答771 围观

问人和小鼠的中性粒细胞大多是Ly6G，CD11b/c，大鼠的中性粒细胞标志物，文献里很少有，也不统一，流式用什么标记比较好？

loveliufudan

人和小鼠的中性粒细胞表面标志物确实大多是Ly6G和CD116/C。对于大鼠中性粒细胞的表面标志物，虽然文献中不太统一，但是CD11b和Ly6G被广泛认为是大鼠中性粒细胞的标志物。对于流式细胞术的标记选择，通常建议使用多个标记共同检测目标细胞。对于人和小鼠中性粒细胞，常用的标记包括Ly6G、CD11b、CD15、CD16和CD66b等。对于大鼠中性粒细胞，常用的标记包括CD11b、Ly6G、CD45

3 回答12114 围观

问细胞片组织片固定的原理

天一湖医者

固定方法可以分为两类:有机溶剂和交联剂。有机溶剂如甲醇和丙酮等可去除类脂并使细胞脱水,同时将细胞结构蛋白沉淀。交联剂如多聚甲醛通常通过自由氨基酸基团形成分子间桥连,从而产生一种抗原相互连接的网络结构。交联剂比有机溶剂更易于保持细胞的结构,但因为交联阻碍抗体结合,可能会降低一些细胞组分的抗原性,因此需要增加一个通透步骤以使抗体能够进入标本。两种固定方法都可能使蛋白抗原变性,因此使用变性蛋白作为抗原生

3 回答2276 围观

问免疫荧光实验通透剂的选择及原理

天一湖医者

一般用 0.1%皂角苷戒 0.02%的Triton X-100 进行通透。

5 回答4227 围观

问细胞转染了带FLAG的质粒为什么看不到荧光？

天一湖医者

和你表达的蛋白有关系.如果转染后24h没有达到蛋白表达的峰值,或者呈比较低的表达量的话,做IF时可能会信号很低,有的甚至可能观察不到信号.

4 回答2491 围观

问请问完全培养基培养条件下，dc2.4细胞是可以不断增殖的吗？我感觉我的dc细胞长得和肿瘤一样快，不知道是不是被肿瘤细胞污染了

loveliufudan

DC2.4是一种小鼠树突状细胞（DC）系列，该细胞系来源于小鼠的转基因肿瘤，可以通过不断培养来保持细胞增殖。然而，这种细胞系的增殖速度比其他小鼠DC系列要快，可能会让人误认为被肿瘤细胞污染了。因此，需要通过一些特定的标志物和功能特征来鉴定DC2.4细胞是否具有树突状细胞的特征，例如：CD11c、CD80、CD86等分子的表达、分泌IL-12和IL-10等免疫调节因子。此外，在进行细胞培养时，需要注

3 回答1024 围观

问免疫组化中，标本的着色位置不对一般是什么原因造成的？

huarenqiang5

可能原因为：1.固定原因；2.修复过度；3.抗体质量原因；4.一抗浓度过高或实验温度过高、时间过长。

3 回答699 围观

问内源性过氧化物酶的灭活时间和浓度是什么？

土井挞克树

一般灭活需要10min，重复三次。

3 回答826 围观

问免疫组化大家一般实验组纳入多少病例数？

huarenqiang5

免疫组化实验组至少4-6病例数。

2 回答830 围观

问求问如何明确目的蛋白的哪个功能结构域起作用？

土井挞克树

可以做肽链分解或者肽链合成来验证

2 回答1839 围观

问Marker没有完全转上，这是什么原因？！！！有一部分在胶上

天一湖医者

首先排除Marker自身问题.你的Marker是否是点在最边上的泳道? 如果在最边上有可能是你的滤纸比膜小, Marker那里没有闭合导致的. 或者边缘位置的膜和胶没贴紧,有气泡, 所以转不过去. 你把Marker点在中间位置看看情况.

5 回答608 围观

问大鼠处死后，心肝脾肺肾等各器官需要多久内固定才能较好地保存组织结构，求大神解惑~

huarenqiang5

一般固定12至24小时最为合适。

3 回答2491 围观

问免疫组化问题求助？？

huarenqiang5

100℃水浴加热法，一般不会导致组织里面的蛋白、酶等生物活性物质失活。沸热修复电炉或水浴锅加热0.01柠檬酸钠缓冲液（ph6.0）至95℃左右，放入组织芯片加热10-15分钟。

3 回答500 围观

问请问，组化拍片，DAB颜色很深，不明亮，像树皮的颜色。我的DAB是5s左右就放入PBS洗了，不知道为什么会这样。

sswei

显色时间很短（如几秒或几十秒）就出现很深的棕褐色，这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长，需要下调抗体浓度或缩短你的抗体孵育时间；此外，若很短时间就出现背景很深，还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全，需要延长封闭时间。

4 回答726 围观

问ELISA实验中，怎样选择最佳的包被抗原浓度以获得最高的灵敏度和特异性？

龙大人驾到

1. 初始的抗原包被浓度可以根据文献或前人经验进行初步选择。2. 进行一系列抗原包被浓度的实验，产生一组数据，以评估不同浓度下的ELISA信号，并确定最佳浓度。3. 可以通过稀释抗原溶液来获得不同的抗原包被浓度。例如，对于包含1mg/ml抗原的溶液，可以通过将其与缓冲液按比例混合并逐步稀释到0.1mg/ml、0.01mg/ml等浓度。4. 对于每种稀释物，与一定数量的特异性抗体进行结合。结合后，可

4 回答3787 围观

问病毒中和实验中，如何确定最佳的病毒和细胞比例以获得最高的病毒中和效果？

龙大人驾到

1. 初始的病毒和细胞比例可以根据文献或前人经验进行初步选择。2. 进行一系列病毒和细胞比例的实验，产生一组数据，以评估不同比例下的中和效果，并确定最佳比例。3. 可以通过稀释病毒溶液来获得不同的病毒浓度。例如，对于包含106个病毒的溶液，可以通过将其与相应量的培养基混合并逐步稀释到10-6的浓度。4. 对于每种稀释物，与一定数量的细胞进行接种。接种后，可以根据实验需要和方法使用不同的检测方法（例

3 回答857 围观

关于丁香通

公司信息

个人用户

企业机构

无忧采购轻松科研

提问

扫一扫

领取干货资料

反馈

TOP

打开小程序