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SCI插图
土井挞克树
可以用3D visible body软件做
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问
免疫荧光实验请教
loveliufudan
1.背景的干净程度可以通过观察荧光信号与噪声之间的对比度来评估。如果荧光信号明显且噪声水平低,则背景较为干净。2.为了避免非特异性干扰,可以通过以下技巧来调整荧光图像的放大比例和选择更好的视野:选择适当的曝光时间和增益来控制荧光强度和信噪比。对于多重染色样品,可以调整荧光通道的颜色合成,以便区分不同的标记。对于复杂样品,可以使用3D成像或多个视角的图像来避免非特异性干扰。3.如果抗荧光淬灭剂含有D
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问
检测血清异常值偏多,如何提高相关性
loveliufudan
T线偏低以及整体相关性较低可能与以下几个因素有关:抗体质量:确保您使用的抗体具有良好的特异性和亲和力。抗体质量对实验结果影响很大。您可以尝试更换其他厂家的抗体或者用不同批次的抗体进行验证。试剂稀释:检查您的抗体、標本和其他试剂的稀释比例。确保您使用了合适的稀释比例,并且遵循了试剂生产商的建议。优化实验条件:例如孵育时间、孵育温度、洗涤次数和洗涤剂的选择等。这些因素可能影响您的实验结果。您可以尝试优
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问
细胞间隙有小点,请问是污染吗?
橙汁儿青柠味
大一点的应该 一些细胞碎片,可能是因为细胞消化吹打过度导致的
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问
划痕如何才能做到笔直且美观?
橙汁儿青柠味
拿着直尺卡在培养板上方,然后用移液枪插一个10ul的枪头,沿着直尺在孔板中划线
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问
细胞培养出现的未知小黑点究竟是什么,根本不像黑胶虫?
橙汁儿青柠味
有可能是支原体污染了,可以采用支原体去除剂
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问
原代细胞分离,例如肠肠皮细胞,分离时间较久,怎么能保证细胞的活力?
橙汁儿青柠味
在冰浴的pbs中分离原代细胞,可以提高细胞存活率
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问
细胞培养出现了许多细胞碎片该怎么办?如何避免?
橙汁儿青柠味
可以通过pbs多洗涤,消化离心去上清等从而去除细胞碎片,主要注意控制胰酶消化时间,防止过度吹打细胞
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问
细胞悬液涂片可以进行免疫组化吗
loveliufudan
细胞悬液涂片可以进行免疫组化(IHC)检测。IHC是一种常用的细胞或组织检测方法,通过检测特定抗原的免疫反应性,来定位和鉴定细胞或组织中特定的蛋白质表达和定量水平。在细胞悬液涂片进行IHC时,需要先将细胞涂在载玻片上,然后进行固定、透明化、抗原修复、抗体染色等操作步骤。不同于组织切片,细胞悬液涂片的特点是细胞形态和结构比较单一,对于特定蛋白的定位,需要选择合适的抗体,并根据抗体的性能,针对具体的免
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问
琼脂糖凝胶电泳
橙汁儿青柠味
主要是引物设计的不够特异,所以pcr出来很多非特异性的条带。可以在设计好引物后,在ncbi上面blast验证一下
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问
qPCR内参Ct值
橙汁儿青柠味
模板cDNA稀释的比较多所以内参的ct值比较大,然后目的基因的表达丰度比较高,所以ct值比内参小
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问
请问怎么从细胞培养基中提取分泌蛋白呢?
橙汁儿青柠味
分泌蛋白存在于培养基中,首先可以减少培养基,从而增加蛋白浓度,如果蛋白量还是不够,可以将蛋白用真空干燥机进行浓缩冻干,然后再进行适当溶解即可。
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问
为什么?小鼠皮肤组织蛋白
橙汁儿青柠味
首先确定蛋白浓度以及上样量足够,其次确定抗体种属正确。
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问
求助,这种情况是不是污染了,如果污染这个是什么菌啊?怎么避免?
dxy_bz3louvw
可能是细胞消化的时候有一些没有吹散,导致细胞有几小团聚堆的,看图片感觉没有污染,如果长菌的话培养基会变混浊的,也可以自己判断一下。
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问
求助 小鼠皮下瘤长成分散瘤怎么办
loveliufudan
出现分散瘤的情况可能是由于注射的细胞或药物没有完全聚集在一起,导致瘤子在皮下生长时分散成了多个小瘤子。为了避免分散瘤出现,可以在注射前将细胞或药物均匀混合,并确保注射时将其聚集在一起。对于长有多个瘤子的情况,可以使用计算机辅助测量工具,如ImageJ等,对每个瘤子的长径和短径进行测量并计算平均值。也可以使用其他测量方法,如用卡尺和直尺测量瘤子的长径和短径。需要注意的是,测量时要避免压迫瘤子,以免影
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问
u87细胞培养问题求助?
是TTT
听你的描述很可能是黑胶虫污染,可以买黑胶虫去除剂试试
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问
免疫荧光很多蓝点,请问是什么原因呢?
橙汁儿青柠味
这可能是一些细胞碎片或者操作中可能混入一些杂质,多用pbs洗涤几次
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问
敲降某甲基化转移酶以后,wb显示组蛋白H3K27me3和H3K4me3的水平不发生变化,请问是需要对细胞做什么处理再跑wb吗?
是TTT
你用的抗体是什么抗体呢,单甲基化抗体?
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问
贴壁细胞mkn45消化用37度两分钟总是消化不下来,每次都要搞很久,细胞状态就不好了,该怎么办呢
是TTT
可以在显微镜下观察,细胞变成圆形,就可以加培基终止消化,并且吹打下来了,这种方法比较科学
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问
用药物阻断H226细胞中的YAP - TEAD通路后,通过IP实验提取出YAP和TEAD蛋白
是TTT
药物阻断前呢,这两个蛋白分子量在不同的位置吗?如果胶的配方,电泳等都一致的话,这两个分子阻断前后分子量不一样,可能是药物对他们发生了修饰左右,例如糖基化等等,可能会影响分子量
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