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问
外泌体超速离心后,离心管底部出现褐色沉淀,这是为什么?
sswei
因为外泌体样品中含有杂质的缘故。
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问
请问鸟类的血液去除血浆后的血细胞能否提取DNA
此用户已注销
能~除红细胞血小板外~其他细胞细胞沉淀可分别提取DNA和RNA
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问
易错pcr如何才能p出亮的条带
汤姆卜丽波
主要是你要用到特异性高的引物,然后循环时间多一点
3 回答
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问
为什么在细胞培养实验中,我培养的细胞分布不均匀,会出现不规则黑点,可能是什么原因导致的?
汤姆卜丽波
如果有不规则黑点,首先观察培养基有没有污染,可以空培看看,然后看是不是环境黑胶虫污染
5 回答
498 围观
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问
细胞培养背景有不会动的黑点,是怎么回事?
此用户已注销
细胞营养不良,生长状态欠佳,或细胞老化都有可能在培养过程中出现小黑点。通常经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多。有些沉淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物“,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖。
4 回答
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问
培养原代小鼠心肌细胞,胰酶消化过程需要多久呢?消化了10分钟,感觉细胞就都死了。提取的组织是不是不能用PBS代替冲洗呢?
sswei
原代小鼠心肌细胞胰酶消化过程2-3分钟即可。
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1907 围观
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问
请问大家,我这分的小鼠附睾上皮细胞上午还是这样,下午它就离我远去了,这是怎么回事?
汤姆卜丽波
亮点的部分成块状的感觉是感染,细胞密度也不大
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问
平板克隆实验细胞散落怎么办?
汤姆卜丽波
你可以在加大一点血清的用量,还有就是因为平板克隆周期比较长,所以注意不要经常去看它容易污染
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问
ST细胞和PK细胞传代时,怎样防止其聚堆生长?
sswei
原因:传代时细胞吹打不均匀,没有将细胞团吹散;吹打太用力造成细胞死亡,细胞死亡释放的DNA与其他细胞形成黏性的细胞团;细胞离心速度多大或者离心时间过长;细胞长的太满才进行传代操作。正确做法:消化前加入适量缓冲液对细胞进行清洗,清除死亡的细胞团和部分堆叠杂质;消化后吹打时上下左右吹打约10次左右,注意控制力度;确定细胞正确的离心条件,严格按条件执行;细胞汇合度在80%~90%即可传代。
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问
请问细胞这样是染什么菌了?一直长的很慢,我就没有换液,后来就这样了
汤姆卜丽波
霉菌,之前我的细胞也是这种,超净台,培养箱彻底清洁一遍
4 回答
491 围观
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问
迁移的细胞为什么会连成团?
汤姆卜丽波
可能是你一开始没有把细胞吹散所以后面会结块生长,这种其实计数是不准确的
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809 围观
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问
image J免疫荧光细胞计数为啥总出问题,显示阈值设置不对,为啥呀?
汤姆卜丽波
你可以自己设定选择合适阈值Image-Adjust-Auto Threshold选择Try all,点击OK后会列出所有算法设定的阈值:根据结果判断,选择Default算法即可
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2913 围观
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问
久置培养基内出现黄色团块,加入双抗会有所改善,但以往在胎牛血清中也见过类似团块(培养基内加入血清使用) 此团块一般是什么原因引起
loveliufudan
黄色团块在培养基中出现通常是由于细菌或真菌等微生物的生长引起的。这些微生物可以污染培养基,从而在其中生长形成团块。另外,如果培养基或添加的成分质量不佳或保存不当,也可能会导致团块的形成。在使用含有胎牛血清的培养基时,团块的形成可能是由于胎牛血清中的脂质、蛋白质或其他成分在培养条件下聚集形成的。这种现象在胎牛血清中比较常见,但也可能出现在其他血清或血清替代品中。加入双抗可以抑制一部分微生物的生长,从
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1744 围观
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问
Transwell一般多久固定比较合适啊?
sswei
Transwell一般固定的时间在24小时以内较合适。
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1356 围观
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问
目的蛋白是否外泌出细胞外的验证
汤姆卜丽波
如果你的目的蛋白太少了其实wb很难检测到,可以用elisa试试,你也可以把细胞沉淀也试试
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问
WB检测GFP融合蛋白,条带大小不对
loveliufudan
可能是由于以下几个原因:目的蛋白融合GFP后的蛋白质折叠发生改变,导致抗体无法识别目的蛋白的特异性表达区域。这种情况下,建议尝试更换抗体,或者使用不同的抗体进行检测。目的蛋白融合GFP后的蛋白质含量较低,导致条带大小与GFP相似。这种情况下,可以尝试增大加载样品的量,或者使用更敏感的检测方法。目的蛋白融合GFP后的蛋白质降解或者聚集,导致条带大小发生改变。这种情况下,建议在提取过程中加入蛋白酶抑制
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问
HepG2无法用DMEM培养基培养
橙汁儿青柠味
每个实验室的习惯不一样,它可能已经习惯了这个培养基。如果要更换培养基,建议在复苏的时候可以尝试一下
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问
请问规定酿酒微生物接种量为1×106,怎样确定这个菌的接种量就是1×106?
loveliufudan
要确定酿酒微生物接种量为1×10^6,可以通过以下方法:液体培养基计数法:将酵母或细菌菌株接种到液体培养基中,经过适当的培养时间后,用计数板对细胞进行计数,然后根据菌落形成的比例来计算接种量,从而得到所需的接种量。集落计数法:将菌株接种到固体培养基上,培养适当的时间后,用集落计数板对形成的菌落进行计数,并根据菌落大小和形态来确定接种量。光密度法:通过测量细胞的光密度来确定接种量,可以通过与已知浓度
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问
关于pcr特异性引物
loveliufudan
不同的PCR方法,例如qPCR、long-PCR和普通PCR,通常会使用不同的引物。这是因为不同的PCR方法需要针对不同的目的进行设计,因此需要选择适合特定PCR方法的引物。特异性引物的选择也需要考虑到共生菌的特性和目标基因序列的多样性。如果您要同时检测两种不同瓢虫体内共生菌,使用相同的特异性引物可能会导致交叉反应,从而使得结果不准确。因此,最好为每个目标共生菌设计独特的引物,以确保检测的特异性。
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759 围观
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问
做qPCR,ct值为35,有参考意义吗?
dangaozhanghui
通常情况下是没有意义的,这种基本判定为不表达。但也要具体情况具体分析,因为有些特殊的检测,需要对照试剂盒给出的参考范围,进行判断(●°u°●)」
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