冰糖葫芦小番茄
流式固定破膜分选完的细胞还能提RNA和免疫荧光吗
Dr_劉医生
流式分选后对RNA提取的影响是存在的。但是,如果你使用TRIZOL等有机溶剂进行RNA提取,那么流式分选后的细胞仍然可以用于RNA提取。
loveliufudan
流式细胞仪分选后的细胞在某些情况下仍可用于其他实验,但需考虑到分选过程对细胞的影响。
提取RNA:分选后的细胞可以进行RNA提取。然而,需要注意的是,流式细胞仪分选过程中可能会对细胞造成一定的压力,从而影响RNA的质量和数量。为了获得高质量的RNA,建议在分选后尽快处理细胞并提取RNA。使用适当的RNA保存和提取方法可以帮助保持RNA的完整性和稳定性。
免疫荧光:关于免疫荧光实验,由于流式细胞仪分选过程中通常使用了固定剂(如甲醛)和破膜剂(如Triton X-100),细胞已经被固定和渗透。这可能会影响后续的免疫荧光实验,因为细胞已经不是活体状态,且细胞内蛋白质结构和抗原位点可能受到固定剂的影响。
尽管如此,分选后的细胞仍可尝试进行免疫荧光实验,但需注意实验结果可能受到流式分选过程中固定和渗透步骤的影响。可能需要优化实验条件(如抗体浓度、孵育时间等),以获得可靠的结果。
土井挞克树
破膜后的细胞RNA极不稳定,大概率已经降解,不建议再提取了