丁香通
丁香园
论坛
医药招聘
丁香医生
更多
调查派
用药助手
丁香搜索
医药数据库
来问医生
我要登录
|
免费注册
|
我的丁香通
企业机构:
成为企业机构
个人用户:
个人中心
移动端
搜实验
大家都在搜
大家都在搜
0 人通过求购买到了急需的产品
免费发布求购
搜索
发布求购
实验专区
实验库(10000+)
实验问答
实验专题
热门视频
前沿资讯
科研者之家
丁香通
>
实验专区
>
实验问答
>
全部
实验问答
31,802,470 科研人在看
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
请教。我有一个目的片段大小在210,熔解曲线跑出的tm值达到了93,这个正常么,有人说温度越高,特异性越好,是这样么?
juyue2010
正常,这个与你扩增的目的条带gc含量有关
3 回答
424 围观
3 回答
424 围观
去回答
问
PCR扩增产物不是预期的条带,哪里出了问题?
juyue2010
可能设计引物时用的是cDNA,忽略了基因组上内含子
3 回答
1016 围观
3 回答
1016 围观
去回答
问
单细胞蛋白质组中应用单分子测序技术,但蛋白质有20种不同的氨基酸,加上翻译后修饰,繁杂的工作量,怎么明确进行区分?
土井挞克树
可以做空间组学区分,空间组学会根据序列和位置进行区分
2 回答
576 围观
2 回答
576 围观
去回答
问
CTAB法提取RNA
土井挞克树
CTAB提RNA步骤:1.取1.5ml的离心管加入1ml预热的CTAB缓冲液(亚精胺)(65度),加20ul(β-巯基乙醇)。2.取材料研磨加入1.5ml的离心管中65度,10min(15min)加热,期间多次震动,摇匀。3.取上清至另一1.5ml加入等体积氯仿异戊醇(24:1)振荡摇匀,4度,12000rpm,10min离心,取上清至另一1.5ml的离心管中。4.重复一次。取上清至1.5ml的离
2 回答
3914 围观
2 回答
3914 围观
去回答
问
HepG2细胞出现小亮点,怀疑是白色念珠菌,但24小时培养基仍是澄清的,数量增加。高倍镜下观察没有动,且板里存在黑胶虫污染
sswei
培养基不浑浊,就有可能是细胞碎片,这种一般是细胞死亡裂解导致,原因有:1.营养或培养条件不行,细胞死亡;2.黑胶虫污染。
3 回答
876 围观
3 回答
876 围观
去回答
问
我跑出来的Co-IP,为什么IgG有很浓的条带
土井挞克树
igG条带很浓可能是样品被蛋白酶降解导致的,建议添加蛋白酶抑制剂,且所有操作保持4℃以下冰上操作并防止冻融。
3 回答
12305 围观
3 回答
12305 围观
去回答
问
igg组拉不出诱饵蛋白但能拉出捕获蛋白是怎么回事呀 igg和ab组都能拉出来诱饵蛋白
loveliufudan
如果在 Co-IP 实验中,IgG 组无法拉出诱饵蛋白,但能拉出捕获蛋白,可能有以下几种可能的原因:抗体的特异性问题:IgG 组中的抗体可能不够特异性,容易发生非特异性结合,因此无法富集诱饵蛋白。可以尝试使用更特异性的抗体或优化抗体浓度。Co-IP 条件的优化问题:Co-IP 实验中的洗涤条件非常重要,如果洗涤条件不足以去除非特异性结合的蛋白,就可能影响诱饵蛋白的富集效率。可以尝试增加洗涤次数、延
3 回答
709 围观
3 回答
709 围观
去回答
问
请问26147试剂盒为什么洗不掉重链呀?频率还比较高
土井挞克树
重链洗不掉可能是交联作用太强了,可以加用裂解液增强洗脱
3 回答
601 围观
3 回答
601 围观
去回答
问
关于用只识别天然蛋白的二抗,去除轻重链。洗脱下来的IP抗体是变性的,为什么目标蛋白不是变性的?
土井挞克树
大概率是因为环境不同,如ph,温度的差异导致ip抗体变性。
3 回答
763 围观
3 回答
763 围观
去回答
问
裂解液如何选择? 如何做泛素化的IP,条带怎么看
sswei
用于普通的Western、IP或co-IP,推荐使用Western及IP细胞裂解液,另外该裂解液裂解的产物也适合用于磷酸化蛋白的Western检测。对于某些特殊蛋白的IP,如果发现Western及IP细胞裂解液效果不是非常理想,可以尝试用RIPA裂解液(强、中或弱)或NP-40裂解液。如果发现IP的时候背景很高,即非特异的蛋白也被IP下来,则需要选用裂解强度较高的裂解液,例如RIPA裂解液(强或中
4 回答
3704 围观
4 回答
3704 围观
去回答
问
黑胶虫污染,会影响动物造模实验吗
呵呵呵呵呵2333
黑胶虫污染会影响结果的准确性。
6 回答
674 围观
6 回答
674 围观
去回答
问
单细胞测序是否需要生物学重复?一般需要多少个才可以?
sswei
临床样本在开展单细胞实验时,每组样本能至少达到6-8例;非临床样本开展单细胞转录组测序,每组样本数能至少达到5-6例。
3 回答
6430 围观
3 回答
6430 围观
去回答
问
细胞消化的过了影响后续的功能试验吗
呵呵呵呵呵2333
会影响,细胞消化过了会影响试验
7 回答
1488 围观
7 回答
1488 围观
去回答
问
细胞污染,被支原体污染
是TTT
可以高压灭菌加热培箱此方法更加方便:75%酒精擦拭培箱里面,将板子拆卸放入细胞操作台紫外灭菌半小时再重新装入细胞培基里面添加支原体抗生素预防支原体污染
9 回答
1447 围观
9 回答
1447 围观
去回答
问
做细胞增殖实验,可以用丙酮作为药物溶剂吗? dmso溶解度太小,无法保证0.1%。
loveliufudan
丙酮可以用作药物溶剂,但需要注意以下几点:细胞对丙酮的敏感性较大,丙酮浓度过高会对细胞产生毒性作用,因此需要控制丙酮的浓度,一般建议不要超过0.5%。丙酮溶解药物的能力较差,需要根据药物的性质选择合适的溶剂。如果 DMSO 溶解度太小,可以考虑使用其他的溶剂,如甲醇、乙醇等。在实验过程中,应该设置合适的对照组,以评估丙酮对实验结果的影响。同时,还应该对丙酮进行空白对照实验,以确定是否会对实验结果产
5 回答
2161 围观
5 回答
2161 围观
去回答
问
WB只能跑出来内参没有目的条带 求助
z流沙z
这种情况一般可能考虑抗体种属的问题,确认一下一抗二抗的种属正确
6 回答
1863 围观
6 回答
1863 围观
去回答
问
HepG2细胞从边缘脱落,有什么可能的原因
是TTT
可能存在支原体污染,支原体污染是细胞培养过程中常见的污染。有两种方法可以检测:1.细胞培基里面添加一定量的支原体去除剂,观察细胞状态是否有所改善。2.有支原体检测试剂盒可以检测。
5 回答
732 围观
5 回答
732 围观
去回答
问
coip结果分析-救救孩子吧!!!
是TTT
这种结果没有意义60的位置可能是重链,110没有条带你需要排除以下原因:一.跑input排除蛋白没有降解。二.确认A抗体说明书可以用来做co-ip。三.co-ip全程需要冰上或者4℃。四.co-ip完成以后,蛋白洗脱步骤是否无误。五.co-ip实验除了需要有实验组,还应该设置对照组,对照组应为同种属的iGg抗体去拉
5 回答
450 围观
5 回答
450 围观
去回答
问
THP1细胞用PMA诱导分化成巨噬细胞后,还能继续增殖吗?
是TTT
理论上THP1细胞用PMA诱导分化成巨噬细胞后,增殖只是受到抑制,但是实际上基本不会再增殖。诱导前接种细胞细胞密度以1-2×10⒌为宜
8 回答
3191 围观
8 回答
3191 围观
去回答
问
如何利用stata比较两组数据的相关性?
土井挞克树
建议你计算Pearson相关系数来看两组数据的相关性:具体命令格式:correlate(简写:cor或corr)[varlist][if][in][weight][,options]在Stata中,命令corr用于计算一组变量间的协方差或相关系数矩阵;命令pwcorr可用于计算一组变量中两两变量的相关系数,同时还可以对相关系数的显著性进行检验;option选项中加上sig可显示显著性水平:pwco
2 回答
3633 围观
2 回答
3633 围观
去回答
1
•••
201
202
203
204
205
•••
1014
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
领取干货资料
反馈
TOP
打开小程序