丁香通
丁香园
论坛
医药招聘
丁香医生
更多
调查派
用药助手
丁香搜索
医药数据库
来问医生
我要登录
|
免费注册
|
我的丁香通
企业机构:
成为企业机构
个人用户:
个人中心
移动端
搜实验
大家都在搜
大家都在搜
0 人通过求购买到了急需的产品
免费发布求购
搜索
发布求购
实验专区
实验库(10000+)
实验问答
实验专题
热门视频
前沿资讯
科研者之家
丁香通
>
实验专区
>
实验问答
>
全部
实验问答
31,611,612 科研人在看
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
pc12细胞传代次数过多会出现细胞团块吗,这种是正常的吗
土井挞克树
传代过多,细胞密度过大就会出现细胞团块,建议适当降低细胞密度
5 回答
558 围观
5 回答
558 围观
去回答
问
请教。我有一个目的片段大小在210,熔解曲线跑出的tm值达到了93,这个正常么,有人说温度越高,特异性越好,是这样么?
juyue2010
正常,这个与你扩增的目的条带gc含量有关
3 回答
420 围观
3 回答
420 围观
去回答
问
PCR扩增产物不是预期的条带,哪里出了问题?
juyue2010
可能设计引物时用的是cDNA,忽略了基因组上内含子
3 回答
1010 围观
3 回答
1010 围观
去回答
问
细胞培养的支原体污染
loveliufudan
在贴壁细胞培养中,常常会出现一种称为“黑胶虫”或“黑粉虫”的污染物,这些污染物主要是由一种叫做“黑色真菌”的微生物所产生的,因其外观呈现黑色而得名。黑色真菌通常是通过空气传播而来,在培养室中会广泛存在,当其落在培养基上并找到适宜的生长条件时,就会在培养基上繁殖生长,并形成黑色的菌落或小粒子,从而污染培养物。这些黑色污染物并不一定是支原体,因此不能简单地将它们视为支原体,而应该进行进一步的鉴定。黑色
3 回答
669 围观
3 回答
669 围观
去回答
问
单细胞蛋白质组中应用单分子测序技术,但蛋白质有20种不同的氨基酸,加上翻译后修饰,繁杂的工作量,怎么明确进行区分?
土井挞克树
可以做空间组学区分,空间组学会根据序列和位置进行区分
2 回答
574 围观
2 回答
574 围观
去回答
问
ALP标记抗体方法步骤?
土井挞克树
流程:过碘酸钠氧化-乙二醇终止-加入抗体-碳酸盐透析-硼氢化钠还原-硫酸铵沉淀-溶解透析。
2 回答
1988 围观
2 回答
1988 围观
去回答
问
CTAB法提取RNA
土井挞克树
CTAB提RNA步骤:1.取1.5ml的离心管加入1ml预热的CTAB缓冲液(亚精胺)(65度),加20ul(β-巯基乙醇)。2.取材料研磨加入1.5ml的离心管中65度,10min(15min)加热,期间多次震动,摇匀。3.取上清至另一1.5ml加入等体积氯仿异戊醇(24:1)振荡摇匀,4度,12000rpm,10min离心,取上清至另一1.5ml的离心管中。4.重复一次。取上清至1.5ml的离
2 回答
3889 围观
2 回答
3889 围观
去回答
问
我想问一下我做IP-ms后并没有检测到目标抗体蛋白,后面又做了IP-WB验证结果也是符合质谱的结果,这个是否能说明抗体有问题或者
赛默飞世尔科技
如果整个实验的操作步骤和实验设计没有问题的情况下,IP-MS和IP-WB结果都没有靶蛋白,说明目标蛋白表达量很低。但首先需要排除一下,IP过程中是否存在抗原结合水平低,抗原洗脱水平低等因素的影响。
4 回答
1460 围观
4 回答
1460 围观
去回答
问
请问在Co-IP结果中,阴参也能IP下来是什么原因?已经增加了洗涤的次数,但是洗涤是颠倒混匀的。
土井挞克树
考虑是阴参受到了蛋白污染,或者抗体与某些组分非特异性结合产生了ip条带
3 回答
620 围观
3 回答
620 围观
去回答
问
在我做COIP时,经常会出现IP组蛋白表达甚至超过了INPUT组,是什么原因?
土井挞克树
考虑是抗体特异度差,没有特异性检测到目的蛋白导致的
3 回答
2456 围观
3 回答
2456 围观
去回答
问
IgG也有目的条带,但是比实验组的IP样品弱,怎么办
土井挞克树
igG条带弱可能是由于裂解液中的去垢剂浓度太高或配方过于剧烈、蛋白与蛋白之间的相互作用太弱或不太稳定等原因导致。相应的举措有:1、降低去垢剂浓度或更换去垢剂种类;2、受蛋白的亚细胞定位影响,则新选择裂解液配方来释放目的蛋白;3、选择亲和力更高的抗体以捕获更多的目的蛋白,从而捕获更多的相互作用蛋白;4、选择目的蛋白或相互作用蛋白含量高的样品进行免疫共沉淀实验。
3 回答
601 围观
3 回答
601 围观
去回答
问
我想问下为什么我跑的input,Ip,IGg都有条带
赛默飞世尔科技
input和IP泳道条带可以根据分子量来判断一下是否为目的蛋白,igg泳道通常是会在25kd,50kd出现抗体轻重链干扰条带
3 回答
3734 围观
3 回答
3734 围观
去回答
问
我跑出来的Co-IP,为什么IgG有很浓的条带
土井挞克树
igG条带很浓可能是样品被蛋白酶降解导致的,建议添加蛋白酶抑制剂,且所有操作保持4℃以下冰上操作并防止冻融。
3 回答
12281 围观
3 回答
12281 围观
去回答
问
igg组拉不出诱饵蛋白但能拉出捕获蛋白是怎么回事呀 igg和ab组都能拉出来诱饵蛋白
loveliufudan
如果在 Co-IP 实验中,IgG 组无法拉出诱饵蛋白,但能拉出捕获蛋白,可能有以下几种可能的原因:抗体的特异性问题:IgG 组中的抗体可能不够特异性,容易发生非特异性结合,因此无法富集诱饵蛋白。可以尝试使用更特异性的抗体或优化抗体浓度。Co-IP 条件的优化问题:Co-IP 实验中的洗涤条件非常重要,如果洗涤条件不足以去除非特异性结合的蛋白,就可能影响诱饵蛋白的富集效率。可以尝试增加洗涤次数、延
3 回答
702 围观
3 回答
702 围观
去回答
问
请问26147试剂盒为什么洗不掉重链呀?频率还比较高
土井挞克树
重链洗不掉可能是交联作用太强了,可以加用裂解液增强洗脱
3 回答
596 围观
3 回答
596 围观
去回答
问
关于用只识别天然蛋白的二抗,去除轻重链。洗脱下来的IP抗体是变性的,为什么目标蛋白不是变性的?
土井挞克树
大概率是因为环境不同,如ph,温度的差异导致ip抗体变性。
3 回答
756 围观
3 回答
756 围观
去回答
问
同一细胞系,用相同载体构建的不同基因的稳转株可以用相同的对照吗?
冰芷汀
同细胞株相同载体构建的可以用之前的
6 回答
974 围观
6 回答
974 围观
去回答
问
(求助)大鼠CCD模型
loveliufudan
大鼠CCD模型的L形不锈钢棒通常需要根据实验需要进行定制,可以考虑以下几个途径:常规实验仪器供应商:大部分实验仪器供应商可以提供不同类型和规格的不锈钢棒,可以通过向供应商咨询和询价的方式了解相关信息。定制加工厂家:如果无法找到符合需求的标准规格不锈钢棒,可以考虑委托定制加工厂家制作符合实验需要的L形不锈钢棒。可以通过搜索相关加工厂家并进行询价等方式获取信息。个性化3D打印:使用3D打印技术可以根据
3 回答
1536 围观
3 回答
1536 围观
去回答
问
选错胰酶伤害过的细胞养起来还能正常使用吗?会影响后期实验结果吗?
冰芷汀
不建议使用,会影响后期功能试验
5 回答
656 围观
5 回答
656 围观
去回答
问
细胞冻在负80冰箱忘记了,半年后拿出来复苏会影响细胞的功能吗。
loveliufudan
长时间存放在负80℃的条件下可以帮助保护细胞,并确保其在复苏时保持较好的功能。一般情况下,细胞在负80℃的环境下保存长达数年也是可能的。因此,如果您将细胞存放在负80℃的冰箱中半年,通常情况下不会对其功能产生太大影响。然而,细胞存储在负80℃的环境下也需要一些特定的保存和恢复方法。在进行复苏之前,应该使用适当的冻存液体对细胞进行保护,并在复苏前将其缓慢回温。此外,细胞在冻存和解冻过程中也容易受到损
4 回答
3465 围观
4 回答
3465 围观
去回答
1
•••
201
202
203
204
205
•••
1014
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
领取干货资料
反馈
TOP
打开小程序